藥物誘導(dǎo)后的胚胎胰腺干細胞胰島素分泌的研究.pdf

1、目的：探索胚胎胰腺干細胞經(jīng)藥物誘導(dǎo)成為胰島素分泌細胞(IPCs)后胰島素的分泌情況，為臨床上尋求最佳移植時間提供理論依據(jù)。
　　 方法：1.取引產(chǎn)14-20周的人胚胎，體外分離出的胚胎胰腺，免疫組織化學方法鑒定巢蛋白陽性細胞，培養(yǎng)獲得胚胎胰腺干細胞。
　　 2.經(jīng)藥物誘導(dǎo)若干天后，雙硫腙(DTZ)染色鑒定誘導(dǎo)后的細胞是否成為胰島素分泌細胞(IPCs)。
　　 3.分別用高濃度(20mmol/L)和低濃度(5.5m

2、mol/L)的葡萄糖溶液刺激誘導(dǎo)后的細胞，利用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)的方法測定其分別在高低濃度糖溶液刺激下胰島素釋放情況;并用ELISA檢測糖溶液刺激下該細胞群2周內(nèi)胰島素的分泌情況。
　　 結(jié)果：1.免疫組織化學檢測得到巢蛋白陽性細胞，證明胰腺干細胞的存在。
　　 2.誘導(dǎo)后細胞可被DTZ染色成猩紅色，證明IPCs形成。
　　 3.經(jīng)誘導(dǎo)后IPCs在兩種濃度糖溶液刺激下均分泌胰島素，且高糖溶液刺激下胰島

3、素分泌量明顯高于低糖溶液，分別為[(137.41±6.02)U/L，(106.40±8.61)U/L，t=7.228，P＜0.01)]。IPCs在糖溶液刺激下第7天與第9天的胰島素分泌量明顯高于其他各天(F=38.373，q=3.033～6.085，P＜0.05);第7天與第9天比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：離體條件下，胚胎胰腺干細胞經(jīng)藥物誘導(dǎo)后可分化為具有分泌胰島素能力的細胞，該細胞在糖溶液刺激下兩周內(nèi)可