人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向胰島素分泌細(xì)胞分化的實驗研究.pdf

1、目的:
　　探討人臍帶華爾通膠質(zhì)來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)分化為胰島素分泌細(xì)胞的可能性,為1型糖尿病的細(xì)胞移植治療提供理論依據(jù)和新的細(xì)胞來源。
　　材料和方法:
　　從足月剖宮產(chǎn)的新生兒臍帶華爾通膠質(zhì)中分離培養(yǎng)出間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs),用含尼克酰胺和β巰基乙醇的低糖 DMEM培養(yǎng)基(L-DMEM)預(yù)誘導(dǎo)后,以含尼克酰胺和β巰基乙醇的高糖DMEM培養(yǎng)基(H-DMEM)誘導(dǎo)其向胰島素分泌細(xì)胞分化,應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)檢測

2、胰島素的表達(dá),以雙硫腙染色鑒定胰島β細(xì)胞,并用放射免疫法(RIA)檢測誘導(dǎo)后細(xì)胞培養(yǎng)液中的胰島素水平,所有檢測均以未誘導(dǎo)細(xì)胞作為實驗對照。
　　結(jié)果:
　　從人臍帶華爾通膠分離、培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞,可貼壁生長,體外生長形態(tài)類似于成纖維細(xì)胞,可以維持未分化狀態(tài)穩(wěn)定增殖,體外增殖可超過10代。尼克酰胺和β巰基乙醇聯(lián)合誘導(dǎo)可使人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)向胰島素分泌細(xì)胞分化,分化的細(xì)胞表達(dá)胰島β細(xì)胞的標(biāo)記胰島素(insulin)

3、。雙硫腙染色發(fā)現(xiàn)臍帶華爾通膠來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)經(jīng)尼克酰胺和β巰基乙醇誘導(dǎo)后細(xì)胞內(nèi)鋅離子增加。通過 Insulin放射免疫法(RIA)檢測誘導(dǎo)前后細(xì)胞培養(yǎng)液中胰島素的濃度,發(fā)現(xiàn)實驗組和對照組胰島素水平分別為6.63mIU/L和3.39mIU/L,差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。
　　結(jié)論:
　　人臍帶華爾通膠中含有豐富的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs),易于培養(yǎng)擴增。人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)經(jīng)尼克酰胺和β巰基乙醇