Raf激酶抑制蛋白（RKIP）在神經(jīng)母細胞瘤中的表達及其臨床意義的研究.pdf

1、1.研究背景與目的： 神經(jīng)母細胞瘤(Neuroblastoma，NB)是小兒時期最常見的顱外實體瘤，約占小兒腫瘤的8-10％。NB是一種高度異質(zhì)性的惡性腫瘤。一些神經(jīng)母細胞瘤可以自發(fā)消退或者分化成良性的神經(jīng)節(jié)細胞瘤，單純手術治療可治愈I期及II期病例，嬰兒期的病例即使已處于廣泛期仍然具有較好的預后。但大于一歲的晚期的病例，雖采用強烈化療、手術、放療、造血干細胞移植及生物治療等綜合治療手段，預后仍差，5年生存率不足40％。因此如何

2、進一步提高晚期病人療效及探索新的預后指標成為研究熱點。 文獻報道的NB的分子預后指標很多，但除公認的MYCN基因擴增與不良預后明確相關外，其他指標的意義仍然存在分歧，其臨床應用價值仍未得到普遍認可。國際兒童腫瘤協(xié)作組，基礎各項研究中發(fā)現(xiàn)的臨床預后指標，制定了神經(jīng)母細胞瘤臨床危險度分層系統(tǒng)，并推廣應用于臨床(詳見前言)。因需要進行基因檢測，此危險度分層系統(tǒng)在國內(nèi)應用尚較困難。如何找到簡便易行且能更好預測NB生存的指標成為臨床研究的

3、熱點。 Raf激酶抑制蛋白(RafKinaseinhibitorprotein,RKIP)是磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白家族成員。RKIP在多種實體腫瘤，如前列腺癌、腸癌、乳腺癌、惡性黑色素瘤中能抑制腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移和植入，其表達水平與腫瘤轉(zhuǎn)移潛能呈負相關，高表達者預后較好。神經(jīng)母細胞瘤尚無相關的研究報道?；谄湓谄渌[瘤中的研究發(fā)現(xiàn)，我們推測RKIP可能在神經(jīng)母細胞瘤中的發(fā)生發(fā)展，轉(zhuǎn)移，耐藥及復發(fā)中可能起重要作用。 本研究通過免

4、疫組化法檢測RKIP在NB的表達情況，分析其與患者的臨床特征、近期療效、遠期生存及預后因素的關系，旨在探討該指標對NB的預后預測價值，從而為進一步臨床治療決策的制訂和預后判斷提供新的依據(jù)。 2.研究方法： 1996年1月-2007年12月在中山大學腫瘤防治中心就診并有組織臘塊的神經(jīng)母細胞瘤患者共48例，全組患者中位年齡4歲(0.1-23歲)，<1歲患者3例(6.3％)，男性32例(66.7％)，女性16例(33.3％)。

5、按INSS分期II期者2例(4.2％)，III期者17例(35.3％)，IV期患者27例(56.3％)，IVs期患者2例(4.2％)；原發(fā)于腹部者34例(70.8％)，原發(fā)縱隔者9例(16.6％)，其他部位5例(12.6％)；骨髓侵犯者21例(43.8％)，骨轉(zhuǎn)移者9例(18.8％)；進行化療且有療效評價者39例(81.3％)，未行化療或者無法評價者9例(18.7％)。 采用免疫組織化學方法(三步法)檢測患者腫瘤組織RKIP的表

6、達情況。以Fromowitz法評估RKIP的表達強度，并分為低表達和高表達兩組，分析其與患者的臨床特征，如年齡，INSS分期、腫瘤原發(fā)部位、是否有骨髓侵犯、是否有骨轉(zhuǎn)移等的關系，以及RKIP不同表達水平對近期療效和遠期生存的影響。 用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計。 3.結(jié)果： RKIP在NB中的陽性表達主要位于細胞漿及質(zhì)膜。全組48例患者陽性率為89.6％(43/48)，其中弱陽性(+)23例(47.6

7、％)，陽性(++)18例(37.5％)，強陽性(+++)2例(4.2％)。低表達(-~+)28例(58.3％)，高表達(++~+++)20例(41.7％)。 RKIP表達與患者年齡、分期、腫瘤原發(fā)部位、有無骨轉(zhuǎn)移及骨髓轉(zhuǎn)移等臨床特征無關。結(jié)果顯示化療有效組RKIP高表達者占38.2％(13/34例)，化療無效組RKIP高表達者占60％(3/5例)，兩組差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 48例患者中位生存期(MS)25個

8、月(95％置信區(qū)間12.2-38.4個月)，總的1、2、3年生存率(OS)分別為79.5％、47.3％和30.1％。RKIP低表達組和高表達組的無進展生存，2年PFS分別為17.6％、43.8％；兩組間的總生存差異無顯著的統(tǒng)計學意義(P=0.109)。RKIP低表達組和高表達組兩者的3年OS分別為16.4％和43.5％；兩組間的總生存差異無顯著的統(tǒng)計學意義(P=0.080)。單因素生存分析，性別、年齡、INSS分期、原發(fā)部位、有無骨轉(zhuǎn)移

9、、有無骨髓轉(zhuǎn)移及RKlP的表達水平與神經(jīng)母細胞瘤總生存分析顯示，只有INSS分期具有統(tǒng)計學意義；以上因素再進一步作Cox回歸分析，結(jié)果顯示分期、KRIP表達水平是神經(jīng)母細胞瘤的預后指標(P<0.05)。 年齡>1歲晚期(III～IV期)且接受基本規(guī)范治療的高危病人39例，我們將這部分病人再次進行統(tǒng)計分析。RKIP低表達組和高表達組兩者的3年OS分別為9.3％和46.2％；兩組間的生存差異具有顯著的統(tǒng)計學意義(P=0.016)。單

10、因素生存分析性別、INSS分期、原發(fā)部位、有無骨轉(zhuǎn)移、有無骨髓轉(zhuǎn)移、綜合治療后獲得的狀態(tài)及RKIP的表達水平與神經(jīng)母細胞瘤生存分析顯示，INSS分期、綜合治療后獲得的狀態(tài)及RKIP的表達水平是神經(jīng)母細胞瘤的預后指標；Cox回歸分析，結(jié)果顯示治療后獲得的狀態(tài)是神經(jīng)母細胞瘤獨立的預后因子(P<0.05)。 4.結(jié)論： 1)RKIP在神經(jīng)母細胞瘤表達上調(diào)，具有較高的陽性率(89.6％)。 2)RKIP表達與患者年齡、原