STAT5、SOCS1和PTPRO基因在白血病中的表達及意義.pdf

1、目的:許多細胞因子和生長因子通過JAK/(信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子與轉(zhuǎn)錄激活子)STAT途徑傳導(dǎo)信號,其中JAK2與造血關(guān)系最為密切,STAT5是JAK2最主要的下游信號蛋白。STAT5被JAK2磷酸化后形成二聚體,進入核內(nèi),調(diào)控相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄,維持細胞的生長、分化與增殖。染色體異常以及致癌蛋白的形成與白血病(leukemia)的發(fā)生密切相關(guān),它們往往通過激活惡性細胞存活與增殖的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑而發(fā)揮作用。在這些信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中,某些基因的過度表達或突變引

2、起的JAK2-STAT5信號途徑的持續(xù)激活對造血干、祖細胞的惡性轉(zhuǎn)化猶為重要,因此藥物阻斷JAK2-STAT5信號途徑進而抑制白血病細胞的增殖已經(jīng)成為白血病靶向治療的重要組成部分。SOCS可以強有力的抑制JAK的催化活性,SOCS蛋白壽命短暫并且作用相似,它們可能通過結(jié)合靶受體,或其他因子發(fā)揮降解作用。SOCS蛋白有相同的結(jié)構(gòu),該家族N末端內(nèi)含有一個SH2區(qū)域,C末端內(nèi)含有保守性極高的CH區(qū),即SOCS盒。生物學(xué)和基因?qū)W研究顯示SOCS

3、家族在終止細胞因子和生長因子的生物效應(yīng)方面發(fā)揮重要作用。受體型蛋白酪氨酸磷酸酶O(PTPRO)是PTPs家族的成員之一,首次是在一項篩選腎小球足細胞特異性蛋白的研究中被發(fā)現(xiàn)并克隆出來的。PTPRO在鼠、人類等脊椎動物中是高度保守的。PTPRO作為一個重要的酪氨酸磷酸酶,是一個候選的腫瘤抑制基因,具有重要的生理功能,但是對PTPRO的研究還處在起步階段。本課題檢測JAK-STAT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中STAT5與細胞因子信號傳導(dǎo)抑制因子SOCS家

4、族成員SOCS1以及受體型蛋白酪氨酸磷酸酶-O(PTPRO)在白血病中的表達情況及臨床意義。
　　 方法:研究對象包括40例AL患者(其中26例為初治AL患者、14例緩解患者),15例慢性粒細胞性白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者,同時以10名健康人作為正常對照組(normal control,NC)?；颊呔鶠槲以貉簝?nèi)科2008年8月-2009年10月期間住院和門診隨訪的病人,經(jīng)過骨髓細胞形

5、態(tài)學(xué)、組織化學(xué)、免疫表型、融合基因、染色體等檢查確診,均符合FAB診斷標(biāo)準(zhǔn)。40例AL患者中,急性髓細胞白血病(acutemyelocytic leukemia,AML)患者29例,FAB分型分別為:M11例、M25例、M315例、M44例、M53例、M61例、M70例,急性淋巴細胞白血病(acute lymphocyticleukemia,ALL)患者11例,包括L13例、L27例、L31例。其中男23例,女17例,中位年齡為32.0

6、歲(2-72歲)。15例CML患者均為慢性期,其中男9例,女6例,中位年齡42.0歲(20-65歲)。10例正常對照為健康志愿者,其中男6例,女4例,中位年齡38.1歲(12-65歲)。采用定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscription polymerase chainreaction,RT-PCR)方法檢測了AL患者、CML患者和10例正常對照骨髓標(biāo)本中STAT-5、SOCS1及PTPRO mRNA的表達。

7、　　 結(jié)果:
　　 1.各組中STAT5表達水平的比較:AL初治組高于正常對照組(P=0.000<0.001)和緩解組(P=0.024)；緩解組高于正常對照組(P=0.000<0.001)和CML組(P=0.000<0.001):CML組高于正常對照組(P=0.006),低于初治組(P=0.000<0.001)和緩解組(P=0.000<0.001)。AL初治組中AML與ALL表達水平無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.685)。
　　

8、 2.各組中SOCS1表達水平的比較:AL初治組及緩解組均低于正常對照組(P=0.000<0.001)；初治組低于緩解組(P=0.014)；CML組低于緩解組和正常對照組(P=0.000<0.001),與初治組差異無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.109)。AL初治組中AML與ALL表達水平無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.131)。
　　 3.各組中PTPRO表達水平的比較:AL初治組及緩解組均低于正常對照組(P=0.000<0.001),初治組低

9、于緩解組(P=0.028),CML組低于正常對照組(P=0.000<0.001)和緩解組(P=0.001),與初治組差異無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.295)。初治組中AML與ALL表達水平無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.158)。
　　 4.1各組中STAT5/PTPRO比值的比較:AL初治組高于緩解組及正常對照組(P=0.000<0.001)；緩解組高于正常對照組(P=0.005)；CML組低于初治組(P=0.001),高于正常對照組(P=0

10、.000<0.001),與緩解組差異無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.237)。AL初治組中AML高于ALL(P=0.000<0.001)。
　　 4.2各組中STAT5/SOCS1比值的比較:AL初治組高于緩解組及正常對照組(P=0.000<0.001)；緩解組高于正常對照組(P=0.000<0.001):CML組低于初治組(P=0.000<0.001),高于正常對照組(P=0.000<0.001),與緩解組差異無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.51

11、1)。AL初治組中AML高于ALL(P=0.000<0.001)。
　　 5.STAT5、SOCS1、PTPRO mRNA表達水平與性別的關(guān)系:55例白血病中男性31例,女性24例,STAT5、SOCS1、PTPRO mRNA三種基因表達水平與性別無關(guān)(P>0.05)。
　　 6.STAT5、SOCS1、PTPRO mRNA表達水平與年齡的關(guān)系:55例白血病中兒童13例,成人42例,STAT5、SOCS1、PTPRO m

12、RNA三種基因表達水平與兒童或成人無關(guān)(P>0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.STAT5在初治AL及CML患者高表達,緩解AL患者表達下降。提示JAK—STAT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的異常激活、STAT5基因的過高表達可能與AL與CML的發(fā)生有關(guān)。
　　 2.SOCSl在初治AL及CML患者均低表達,緩解AL患者表達增高。提示SOCSl過低表達可能與AL與CML的發(fā)生有關(guān)。
　　 3.PTPRO在初治AL及CM