間充質干細胞治療慢性間質性腎炎動物模型意義初探.pdf

1、目的：
　　 通過成功制備腺嘌呤所致慢性間質性腎炎（CIN）的動物模型，將培養(yǎng)的間充質（MSCs）通過尾靜脈的方法注射入大鼠體內，進一步評價干細胞評價間充質干細胞在治療慢性間質性腎炎動物模型治療效果。
　　 方法：
　　 采用腺嘌呤（100mg/kg/d）持續(xù)灌胃的方法，連續(xù)4周，此后停藥4周，檢測部分大鼠的臨床、生化指標，判斷動物模型的情況，在制備模型的過程中，另取Wistar大鼠，成功剝離股骨，取出骨髓至細胞

2、懸液后，于培養(yǎng)皿中分離培養(yǎng)，當細胞基本貼壁、鋪滿瓶底，且大部分細胞培養(yǎng)成梭形時進行傳代，連續(xù)傳3代后備用，此后采用免疫組化方法，鑒定培養(yǎng)細胞CD90、CD34的表達，確定模型、細胞培養(yǎng)均成功后，將剩余大鼠隨機分為三組（A、B和C），A組（移植組）尾靜脈注射培養(yǎng)好的間充質干細胞，B組（非移植組）注入等量生理鹽水，C組（對照組）不予干預，每日觀察大鼠的臨床表現(xiàn)、體重變化，至觀察4周后，將大鼠處死，檢測大鼠處死前的臨床表現(xiàn)、腎功情況以及處死后

3、腎臟的病理變化。
　　 結果：
　　 動物模型制備情況：腺嘌呤灌胃組大鼠表現(xiàn)出明顯的體重下降、多飲多尿、毛發(fā)脫落、精神萎頓、抽搐甚至死亡，將上述癥狀自制成臨床癥狀評分表格，同血清肌酐進行相關分析，發(fā)現(xiàn)兩者呈現(xiàn)明顯的相關性，判斷臨床癥狀評分表格成功，同對照組相關，腺嘌呤灌胃組無論從臨床評分、生化以及病理評分同對照組相比均表現(xiàn)出統(tǒng)計學差異（P<0.05），且病理表現(xiàn)以腎小管、間質損害為主，小球損害輕微，判斷動物模型制作成功，

4、間充質干細胞：可見細胞培養(yǎng)貼滿瓶底，細胞變形成梭形，部分融合，抗體表達CA90+、CD34-，判斷間充質干細胞培養(yǎng)成功。在進行間充質干細胞治療過程中，與正常對照組相比，移植組、非移植組從臨床表現(xiàn)、生化指標以及病理結果均有不同程度的惡化，三組相比存在統(tǒng)計學差異（P<0.05），但當移植組與非移植組進行比較時，兩組差異并不明顯，未見統(tǒng)計學差異（P>0.05）。
　　 結論：
　　 腺嘌呤大鼠動物模型制備成功，間充質干細胞不能