銀杏葉提取物對(duì)過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的: 通過(guò)過(guò)氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK52E)建立氧化損傷模型,觀察銀杏葉提取物( EGB761)對(duì)大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK52E)氧化損傷的保護(hù)作用,研究EGB761對(duì)大鼠腎小管上皮細(xì)胞凋亡的影響,并初步探討其作用機(jī)制。
　　方法: 體外培養(yǎng)的正常大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK52E)分為空白、過(guò)氧化氫誘導(dǎo)組、不同劑量的EGB761保護(hù)組,選擇400μmol/l H2O2作用24小時(shí)作為損傷模型劑量,并給予

2、不同濃度EGB761保護(hù),檢測(cè)SOD數(shù)值,觀察細(xì)胞損傷情況,MTT法觀察細(xì)胞的活性,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,RT-PCR檢測(cè)Survivin,Caspase-3基因mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果: 1、與對(duì)照組相比,100-400μmol/l范圍內(nèi)過(guò)氧化氫(H2O2)對(duì)大鼠腎小管上皮細(xì)胞均有明顯的損傷作用,SOD值明顯降低(P<0.05),均能誘導(dǎo)大鼠腎小管上皮細(xì)胞氧化損傷,MTT發(fā)現(xiàn)細(xì)胞活性降低(P<0.05),流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡率

3、增加(P<0.05)。RT-PCR觀察Survivin mRNA表達(dá)變化不顯著(P>0.05),Caspase-3 mRNA表達(dá)上調(diào)(P<0.05)。2、與400μmol/l過(guò)氧化氫誘導(dǎo)組相比,SOD值上升(P<0.05),MTT示細(xì)胞活性增加(P<0.05),流式檢測(cè)示細(xì)胞凋亡率降低(P<0.05),RT-PCR觀察 SurvivinmRNA表達(dá)上調(diào)(P<0.05),Caspase-3 mRNA表達(dá)下調(diào)(P<0.05)。
　　結(jié)

4、論: 1、過(guò)氧化氫(H2O2)在100-400μmol/l范圍內(nèi)可誘導(dǎo)大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK52E)凋亡;2、 EGB761對(duì)過(guò)氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK52E)凋亡有保護(hù)作用;3、EGB761可能是通過(guò)以下機(jī)制對(duì)H2O2誘導(dǎo)的NRK52E細(xì)胞氧化損傷發(fā)揮保護(hù)作用;①EGB761可通過(guò)提高機(jī)體抗自由基的能力對(duì)腎缺血再灌注大鼠發(fā)揮保護(hù)作用。②EGB761通過(guò)上調(diào)NRK52E細(xì)胞Survivin的表達(dá),下調(diào)Case