銀杏葉提取物對人晶狀體上皮細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用.pdf

1、目的: 研究銀杏葉提取物(ginkgo biloba extract，GBE)對高糖培養(yǎng)的人晶狀體上皮細(xì)胞(human lens epithelial cells，HLECs)凋亡的保護(hù)作用及其可能的分子機(jī)理。 方法: 人晶狀體上皮細(xì)胞B3細(xì)胞系用DMEM低糖培養(yǎng)基(葡萄糖終濃度5.56mmol/L)培養(yǎng)，將培養(yǎng)的細(xì)胞分為正常對照組(NS組，葡萄糖終濃度5.56 mmol/L)、高糖組(HG組，葡萄糖終濃度50 mmol/L)、

2、GBE低濃度組(GL組，10μg/mlGBE-DMEM高糖培養(yǎng)液)，GBE中濃度組(GM組，20μg/ml GBE-DMEM高糖培養(yǎng)液)，GBE高濃度組(GH組，40μg/ml GBE-DMEM高糖培養(yǎng)液)，芐達(dá)賴氨酸(bendazac lysine，BDL)對照組(BDL組，0.5μmol/L BDL-DMEM高糖培養(yǎng)液)。用四甲基偶氮唑鹽(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)比色法測定HLECs的活力；

3、流式細(xì)胞術(shù)測定HLECs的凋亡百分率；Hoechst33258熒光染色觀察凋亡細(xì)胞核的形態(tài)學(xué)變化；可見光分光光度法測定胞漿過氧化氫酶(catalase,CAT)，谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)，總抗氧化能力(total antioxidativecapability,T-AOC)和總超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase，T-SOD)四大抗氧化指標(biāo)的水平、醛

4、糖還原酶(aldose reductase，AR)及半胱氨酸基天冬氨酸-特異性蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3，caspase-3)活性的變化；免疫印跡法測定胞漿內(nèi)Bcl-2和Bax的表達(dá)。 結(jié)果: 與低糖對照組相比，高糖組的HLECs活力明顯降低，細(xì)胞凋亡百分率明顯升高(P<0.01)，較多細(xì)胞出現(xiàn)典型的凋亡細(xì)胞核的形態(tài)學(xué)改變。與高糖組相比，GBE低中高濃度組的HLE

5、Cs活力增強(qiáng)，細(xì)胞凋亡百分率顯著降低且隨GBE濃度增加作用更明顯(P<0.01)，典型的凋亡細(xì)胞核也逐漸減少；GM組和GH組的CAT，GSH-Px，T-AOC和T-SOD的水平顯著提高(P<0.05 or P<0.01)，而GL組和BDL組儀提高T-AOC，GSH-Px的水平，對CAT、T-SOD無明顯作用。GBE還能明顯降低AR的活性(P<0.01)；與高糖組相比，GBE低中高濃度組Bcl-2的表達(dá)增加，Bax的表達(dá)降低，Bax/Bc

6、l-2的比值明顯降低(P<0.01)，caspase-3的活性顯著降低(P<0.01)，且均隨藥物濃度增加作用增強(qiáng)；BDL組的Bax/Bcl-2的比例和caspase-3的活性也有降低(P<0.05 or P<0.01)。 結(jié)論: 高糖能誘發(fā)HLECs凋亡，對細(xì)胞產(chǎn)生損傷作用；GBE能明顯抑制高糖誘導(dǎo)的HLECs凋亡并對細(xì)胞有保護(hù)作用；GBE有很強(qiáng)的抗氧化能力和抑制AR的作用，并能明顯降低Bax/Bcl-2的比值，抑制caspa