變應(yīng)性鼻炎患者外周血iNOSmRNa-iNOS及NO定量檢測在皮質(zhì)類固醇激素治療評價中的作用.pdf

1、[目的]
　　 本實(shí)驗通過檢測變應(yīng)性鼻炎(allergic rhinitis，AR)患者局部應(yīng)用皮質(zhì)類固醇激素治療前后外周血NO、iNOS及EOS的水平變化，并結(jié)合病人鼻黏膜及臨床癥狀改善情況，尋找臨床效果評價的方便、快速的試驗指標(biāo)，為變應(yīng)性鼻炎的治療和病情評估提供新的手段。
　　 [方法]
　　 1、實(shí)驗對象與選擇:變應(yīng)性鼻炎病人組選擇就診我院門診的變應(yīng)性鼻炎患者59例，與組對象均符合中華醫(yī)學(xué)會耳鼻喉科分會推薦

2、的變應(yīng)性鼻炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且皮膚過敏原點(diǎn)刺試驗均為陽性表現(xiàn)，取11例初診及第四周復(fù)診病人鼻黏膜。健康對照組為健康體檢人員50例。10例正常鼻黏膜取自尸檢。
　　 2、實(shí)驗對象癥狀體征評價:確定隨訪時間為四周，每四周對復(fù)診AR病人進(jìn)行癥狀、體征評價，隨訪24周。
　　 3、實(shí)驗方法:抽取初診、復(fù)診AR病人及健康體檢人員的外周血，采用實(shí)時熒光定量多聚酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)方法檢測外周血白細(xì)胞iNOS mRNA水平變化，采用

3、ELISA法檢測血漿iNOS的水平變化，采用硝酸還原酶比色法測定血漿NO含量，并對外周血嗜酸粒細(xì)胞EOS進(jìn)行常規(guī)計數(shù)。
　　 [結(jié)果]
　　 1.變應(yīng)性鼻炎患者癥狀體征的變化:
　　 至第24周隨訪結(jié)束，8例退出實(shí)驗。第4周末復(fù)診，余51例中取得顯著改善的病人34例，有效改善病人16例，無效者1例，顯效率67％，有效率31％，總有效率達(dá)98％，第8周末復(fù)診，無效病人聯(lián)合應(yīng)用抗組胺藥物，癥狀體征得到滿意改善;34例

4、顯效病人有2例病人復(fù)發(fā)，16例有效病人中有3例病人復(fù)發(fā)，對于復(fù)發(fā)的5例病人在接下來的治療中給予皮質(zhì)類固醇激素、抗組胺類藥物聯(lián)合治療，其余病人癥狀體征較前有顯著改善，評分較前降低，治療同前;第12末復(fù)診，32例顯效病人和13例有效病人中均有2人癥狀復(fù)現(xiàn)，補(bǔ)加抗組胺類藥物聯(lián)合治療，其余病人單用皮質(zhì)類固醇藥物，藥量減半，用藥至第16周末復(fù)診;第16周末41例有效病人在所用藥物減半后癥狀控制良好，無復(fù)發(fā)病例出現(xiàn)，其中聯(lián)合用藥病人10例，4例病人

5、對藥物療效滿意，6人不滿意治療效果，癥狀體征評分未見明顯改善;第20周末復(fù)診病人中未見有新復(fù)發(fā)病例出現(xiàn);聯(lián)合用藥治療效果滿意者遵醫(yī)囑繼續(xù)用藥，不滿意者放棄治療;第24周末復(fù)診病人未見有新復(fù)發(fā)病例出現(xiàn)。
　　 2、鼻黏膜HE染色結(jié)果:正常對照組黏膜上皮可見纖毛，間質(zhì)可見少量腺體及淋巴細(xì)胞，偶見EOS（圖5）。AR組黏膜上皮損傷、纖毛減少，表面有炎性滲出物;間質(zhì)水腫、腺體增多可見大量EOS（圖6）。AR病人治療后黏膜上皮完整;間質(zhì)水

6、腫減輕、腺體減少;EOS明顯減少（圖7）。
　　 3、硝酸還原酶比色法檢測變應(yīng)性鼻炎及健康體檢人員外周血NO水平:AR患者外周血NO水平為68.89±9.76(μmol/L)，健康體檢人員外周血NO水平43.47±9.47(μmol/L); AR治療組為55.62±9.89(μmol/L)，比治療前明顯降低。各組相比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.01)。
　　 4、ELISA法檢測變應(yīng)性鼻炎病人組治療四周前、后與健康體檢

7、人員外周血相關(guān)因子含量，并對外周血EOS數(shù)目常規(guī)計數(shù):
　　 4.1、外周血EOS計數(shù)
　　 變應(yīng)性鼻炎患者治療前外周血EOS數(shù)目均明顯高于健康對照組，差異顯著具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.01)，治療后外周血EOS數(shù)目顯著下降，顯著高于健康對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，(p＜0.05)，EOS數(shù)目治療后與治療前計數(shù)做統(tǒng)計學(xué)分析，無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 4.2、外周血iNOS
　　 變應(yīng)性鼻炎患者治

8、療前外周血iNOS水平顯著高于健康對照組，差異顯著，具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.01);經(jīng)局部皮質(zhì)類激素治療后外周血iNOS水平仍明顯高于健康對照組，有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)，變應(yīng)性鼻炎患者治療后外周血iNOS水平較前顯著下降(p＜0.01)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 5、實(shí)時熒光定量PCR法檢測變應(yīng)性鼻炎病人治療四周前、后及健康對照組入組人員外周血白細(xì)胞iNOSmRNA:
　　 變應(yīng)性鼻炎患者治療4周前、后外周血白細(xì)

9、胞iNOS mRNA表達(dá)量明顯高于健康對照組(p＜0.05)，變應(yīng)性鼻炎患者治療前外周血白細(xì)胞iNOS mRNA表達(dá)量明顯高于治療后(p＜0.05)，有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 [結(jié)論]
　　 1.AR病人外周血iNOS-mRNA表達(dá)增加與外周血iNOS水平增加及NO水平增高與臨床癥狀相關(guān)，提示該通路具有重要作用。
　　 2.鼻用皮質(zhì)類固醇激素可降低AR患者外周血NO、iNOS水平，降低EOS數(shù)目，顯著改善臨床癥狀;隨