氯離子轉(zhuǎn)運體KCC2和腦缺血的研究.pdf

1、中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)博士學(xué)位論文氯離子轉(zhuǎn)運體KCC2和腦缺血的研究姓名：王德廣申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：神經(jīng)生物學(xué)指導(dǎo)教師：徐天樂20051201中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)博士學(xué)位論文這些腦區(qū)包括嗅球、視交叉上核、脊髓的背根神經(jīng)元以及韁內(nèi)側(cè)核(medialhabenula，MHb)。嗅球、視交叉上核和脊髓背根神經(jīng)元因缺少KCC2的氯離子外排作用而表現(xiàn)出對GABA呈現(xiàn)興奮性作用。但MHb不表達(dá)KCC2的mRNA，人們至今尚不清楚GABA在MHb起興奮性作

2、用還是抑制性作用。在本研究中，為探討腦缺血對KCC2表達(dá)的影響，使用全腦缺血模型研究缺血后海馬KCC2表達(dá)的改變，在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步探討缺血性KCC2表達(dá)改變的機制；為探討GABAA信號通路在MHb的作用，使用免疫熒光染色和激光共聚焦成像技術(shù)檢測GABAA信號通路相關(guān)蛋白在此核內(nèi)的表達(dá)和亞細(xì)胞分布，j并用電生理記錄手段進(jìn)一步研究GABAA信號通路相關(guān)的電生理活動。主要的實驗結(jié)果如下：1全腦缺血導(dǎo)致海馬CAl區(qū)神經(jīng)元KCC2選擇性表達(dá)下調(diào)，

3、其下調(diào)是由NMDA受體激活導(dǎo)致的，不是由BDNFTrkB信號通路介導(dǎo)(1)全腦缺血導(dǎo)致海馬KCC2下調(diào)全腦缺血15min，復(fù)灌12hr后海馬CAl區(qū)的KCC2表達(dá)明顯下調(diào)。并被培養(yǎng)海馬神經(jīng)元的氧氣葡萄糖剝奪實驗證實。(2)BDNFTrkB信號通路不參與缺血性KCC2下調(diào)采用免疫印跡和免疫熒光法檢測全腦缺血復(fù)灌后不同時間的BDNF和TrkB受體表達(dá)，結(jié)果顯示缺血復(fù)灌12hr后BDNF和TrkB表達(dá)均無明顯改變，缺血前側(cè)腦室注射BDNF并不