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1、目的:鈣和維生素D是調(diào)節(jié)鱗狀上皮細(xì)胞分化和增殖的重要因子,其調(diào)節(jié)機(jī)制與細(xì)胞膜上的E-鈣粘素和連接素的水平升高有關(guān),本研究旨在探討p120-連接素(p120)抑制鱗癌細(xì)胞增殖的作用和機(jī)制。
方法:為了確定p120是否在鱗癌組織中的表達(dá)水平降低,采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)91例口腔鱗狀細(xì)胞癌患者p120、磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)的水平;為了解p120對(duì)鱗癌細(xì)胞增殖的影響,我們下調(diào)鱗癌細(xì)胞(Tca8113)內(nèi)的p120后,用表皮
2、生長(zhǎng)因子(EGF)刺激細(xì)胞,然后檢測(cè)細(xì)胞增殖水平;為明確p120對(duì)細(xì)胞核內(nèi)PLC-γ1信息傳遞的影響,我們下調(diào)p120后用EGF刺激細(xì)胞,利用Western-blot檢測(cè)細(xì)胞核PLCγ-1信號(hào)通路中各蛋白的水平;為確定p120是否影響細(xì)胞核內(nèi)PLCγ-1與磷脂酰肌醇3激酶增強(qiáng)因子(PIKE)的結(jié)合,我們下調(diào)p120后用EGF刺激細(xì)胞,用共聚焦顯微鏡對(duì)PIKE和PLCγ-1的定位進(jìn)行觀察研究;為明確p120是否是通過(guò)抑制PLCγ-1進(jìn)而抑
3、制鱗癌細(xì)胞的增殖,我們?cè)谙抡{(diào)p120的同時(shí)下調(diào)PLCγ-1并用EGF刺激細(xì)胞,然后檢測(cè)細(xì)胞增殖水平。
結(jié)果:口腔鱗癌細(xì)胞膜p120的表達(dá)水平低于癌旁組織,而細(xì)胞核PLCγ-1表達(dá)水平高于癌旁組織; p120下調(diào)后,E-鈣粘素和β-連接素在細(xì)胞膜上的表達(dá)水平降低,細(xì)胞膜內(nèi)的PLC-γ1水平下降,細(xì)胞核內(nèi)PLC-γ1的水平升高,EGF誘導(dǎo)的PIKE和PLC-γ1在細(xì)胞核內(nèi)的共定位增加,以及EGF誘導(dǎo)的鱗癌細(xì)胞(Tca8113)的增
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