孕期低劑量酒精暴露對乳腺干-祖細胞的影響.pdf

1、乳腺癌是當今世界女性最多發(fā)的惡性腫瘤。乳腺癌的發(fā)病原因至今仍不是很清楚，目前認為乳腺癌的發(fā)生發(fā)展與內(nèi)分泌、遺傳、環(huán)境等因素及不良的生活的方式有關。其中，吸煙和飲酒是威脅人類健康的兩大因素。已有報道稱飲酒會增加女性患乳腺癌的風險。有研究表明，在子宮內(nèi)酒精暴露還會增加嚙齒動物后代對致癌物質(zhì)引起的乳腺腫瘤的易感性。
　　目的：
　　研究孕期低劑量酒精暴露對乳腺干/祖細胞的影響。
　　方法:
　　本研究模擬孕婦在懷孕期間

2、低劑量的飲酒，給C57BL/6-GFP和C57BL/6兩個品系的孕鼠在其懷孕11天時連續(xù)6天灌胃0.5 g/kg/d的酒精。采集血清、乳腺和子宮等組織進行研究。
　　本實驗研究內(nèi)容分為兩部分:
　　第一部分是研究孕期低劑量酒精暴露對子代雌鼠雌二醇、胰島素樣生長因子、乳腺整體形態(tài)和導管形態(tài)，及其上的雌二醇受體和胰島素樣生長因子受體的影響。
　　第二部分是對乳腺干細胞進行體外定性和定量分析，以查看孕期低劑量酒精暴露對子代小

3、鼠乳腺干細胞數(shù)量和比例的影響。同時，利用干細胞體內(nèi)移植再生實驗來檢驗孕期低劑量酒精暴露對子代小鼠乳腺干細胞功能的影響。
　　結果:
　　本研究的第一部分結果顯示，孕期低劑量酒精暴露使母鼠體內(nèi)的胰島素樣生長因子(IGF-1)水平顯著升高，其乳腺導管增生比例也顯著性增加。對其子代小鼠而言，當子代小鼠3周齡時，實驗組與對照組相比，其乳腺導管距淋巴結的距離顯著性減少，即實驗組小鼠的乳腺導管普遍離淋巴結較近。并且實驗組小鼠體內(nèi)雌二醇(

4、E2)水平顯著性升高，而IGF-1水平則顯著性減少。當子代小鼠6周齡大時，實驗組與對照組相比，乳腺導管占整個乳腺的比例、乳腺導管末段芽(TEB)的數(shù)量及體內(nèi)IGF-1的水平都有顯著性增加，而E2的水平則沒有顯著性變化。當子代小鼠4月齡時，實驗組與對照組相比，體內(nèi)IGF-1的水平顯著性降低了。
　　第二部分研究結果顯示，小鼠乳腺經(jīng)流式細胞儀分選后，雖然實驗組的基底細胞群和管腔細胞群的數(shù)目與對照組之間沒有顯著性差異，但是孕期低劑量酒精

5、暴露后使小鼠乳腺基底細胞在總的乳腺上皮細胞的比例有升高的趨勢，乳腺管腔細胞在總的乳腺上皮細胞的比例也有升高的趨勢，具體體現(xiàn)在管腔細胞中干細胞抗原-1(Sca1)陰性細胞數(shù)有升高的趨勢。而乳腺基底細胞的數(shù)量又有比管腔細胞數(shù)量多的趨勢。細胞群形成的乳腺微球種植在基底膜基質(zhì)中能夠進一步分化形成特定的實體3D結構。體內(nèi)移植再生實驗證明這些實體3D結構能夠生成新的再生乳腺。實驗結果表明，實驗組和對照組相比，移植基底細胞形成的實心3D結構和管腔細胞

6、形成的空心3D結構的乳腺再生率都有所降低，說明實驗組中乳腺干細胞的再生能力受到損害。
　　結論:
　　孕期低劑量酒精暴露導致子代小鼠青春期乳腺（6周齡）導管TEBs數(shù)和乳腺導管占整個乳腺的比例增加。使不同時期子代體內(nèi)激素水平紊亂。且孕期低劑量酒精暴露還導致子代乳腺干細胞和祖細胞比例有增加的趨勢;進一步分析發(fā)現(xiàn)，祖細胞比例的升高主要表現(xiàn)為Scal-祖細胞比例的升高。孕期低劑量酒精暴露還影響了子代乳腺干/祖細胞的再生功能。研究結