Frat2與非小細(xì)胞肺癌患者的惡性表達(dá)和不良預(yù)后相關(guān).pdf

1、前言：
　　細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是當(dāng)今生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域最前沿、最活躍的主題之一。Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑由一系列癌基因和抑癌基因編碼的蛋白質(zhì)組成，是傳遞生長(zhǎng)刺激信號(hào)的通路，它對(duì)控制胚胎發(fā)育起重要作用，而其不恰當(dāng)?shù)幕罨瘏⑴c多種人類癌癥的發(fā)病過(guò)程[1]。
　　Frat最初被證實(shí)是T細(xì)胞淋巴瘤的原癌基因，但它的生物學(xué)功能一直令人困惑，直到它在爪蟾的同源物GBP作為GSK3結(jié)合蛋白被分離出后，人們才知道Frat也是Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的重要組成部分

2、[2]。人類Frat家族包括Frat1和Frat2，F(xiàn)rat/GBP作為GSK3的結(jié)合蛋白，抑制了GSK3對(duì)β-catenin的磷酸化作用[3]，在Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中起正調(diào)節(jié)作用。但仍然有許多問(wèn)題需要研究，例如，重新評(píng)估Frat在Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的作用，是否存在具有Frat內(nèi)在功能的潛在替代物等。目前，F(xiàn)rat2在肺癌組織中的表達(dá)還沒(méi)有明確報(bào)道，以此我們通過(guò)對(duì)Frat2在肺癌組織中的表達(dá)檢測(cè)，進(jìn)一步了解Frat2蛋白在Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)

3、導(dǎo)通路的作用及機(jī)制，同時(shí)進(jìn)一步了解對(duì)肺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移機(jī)制及診斷和預(yù)后的意義。
　　材料與方法：
　　1、材料
　　212例原發(fā)性肺癌組織標(biāo)本，均取自中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2004年8月-2008年12月胸外科手術(shù)切除的標(biāo)本。所有患者術(shù)前均未接受放、化療。標(biāo)本經(jīng)10％中性甲醇固定，石蠟包埋，HE常規(guī)染色后明確診斷。分別出兩名病理醫(yī)師根據(jù)2009年肺癌TNM分期系統(tǒng)和WHO肺癌分類標(biāo)準(zhǔn)，確定腫瘤的組織類型以及臨床病

4、理分期。包括:鱗癌85例，腺癌114例，其他類型13例;高分化68例，中分化100例，低分化25例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者79例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者133例;Ⅰ期90例，Ⅱ期61例，Ⅲ期53例，Ⅳ期8例。性別:男性143例，女性69例。年齡:39-82歲，中位年齡60歲。對(duì)全部212例進(jìn)行了術(shù)后隨訪，隨訪日期計(jì)算從手術(shù)日起，到因復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移而死亡或隨訪截止日期為止，截止日期為2014年1月25日。
　　2、主要試劑和來(lái)源
　　SP免疫組化

5、試劑盒、DAB酶底物顯色試劑盒、0.01M PBS、檸檬酸抗原組織修復(fù)液(PH6.0);一抗為羊抗人Frat2多克隆抗體(Santa Cruz Biotechnology，SantaCruz，CA，USA1∶100)
　　3、實(shí)驗(yàn)方法
　　免疫組織化學(xué)染色及結(jié)果判定組織標(biāo)本經(jīng)10％中性福爾馬林溶液固定，石蠟包埋，制成4μm連續(xù)切片。采用鏈霉素生物素蛋白-過(guò)氧化物酶免疫組化法(S-P法)檢測(cè)Frat2的表達(dá)。結(jié)果判定:選腫瘤細(xì)

6、胞陽(yáng)性染色集中區(qū)域，每張切片計(jì)數(shù)400個(gè)癌細(xì)胞，由兩名病理醫(yī)師雙盲觀測(cè)。Frat2表達(dá)判定標(biāo)準(zhǔn):以胞漿或核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色染色顆粒為陽(yáng)性信號(hào)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≤10％為陰性表達(dá);＞10％為陽(yáng)性表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　免疫組化結(jié)果顯示，F(xiàn)rat2在212例癌組織中高表達(dá)，表達(dá)率為64.6％(137/212)，明顯高于癌旁肺組織中的表達(dá)。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示:Frat2在癌旁肺組織和肺癌組織中的表達(dá)有明顯的差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Frat2異常表達(dá)