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1、青島大學(xué)碩士學(xué)位論文卡介苗對白血病裸鼠抑白血病作用及機制研究姓名:王媛媛申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):兒科學(xué)(小兒血液與腫瘤)指導(dǎo)教師:孫立榮20090530第二部分卡介苗體外激活淋巴細胞對白血病裸鼠殺傷作用的機制研究目的:腫瘤微小殘留病和多藥耐藥是血液腫瘤治療達完全緩解后復(fù)發(fā)和導(dǎo)致難治性的主要原因,成為攻克血液腫瘤的難點。研究表明白血病在獲得完全緩解后進行免疫治療可提高療效,可提高白血病患兒長期無病生存率。本文通過建立人早幼粒白血病(HL6
2、0)突變株細胞異種移植模型,探討卡介苗(BCG)抑制白血病裸鼠白血病細胞生長的作用及其機理,為卡介苗臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法:對8~10周齡的BALB/c裸鼠皮下接種110‘/nilHL60細胞,建立白血病裸鼠模型。首先經(jīng)rhGMCSF斗瑚L4竹11TNFa(GlT)誘導(dǎo)培養(yǎng)DC,應(yīng)用DC激活淋巴細胞,再將體外培養(yǎng)的免疫活性細胞注入裸鼠腫瘤組織內(nèi),根據(jù)DC激活淋巴細胞的方式不同分為Groupl:GIT誘導(dǎo)培養(yǎng)DC與淋巴細胞直接共同孵育
3、;Group2:BCG組(DCBCG淋巴細胞);Group3:滅活BCG組(DC滅活BCG淋巴細胞);Groul)4:DCBCG淋巴細胞HL60抗原組,觀察各組裸鼠帶瘤生存情況,采用HE染色觀察白血病細胞的浸潤,采用免疫組化了解免疫細胞的反應(yīng)及分布。結(jié)果:(1)HL一60細胞植入裸鼠皮下,5~7天發(fā)現(xiàn)各組裸鼠于體表接種部位形成淡紫紅色的腫塊,并逐漸出現(xiàn)局部及肝臟脾臟浸潤(2)裸鼠腫瘤組織內(nèi)接種體外激活的免疫細胞后,各組均出現(xiàn)不同程度的腫
4、瘤組織壞死現(xiàn)象。(3)免疫活性淋巴細胞組裸鼠較其他藥物治療組的裸鼠生存時間延長約1以天。(4)實驗各組腫瘤組織內(nèi)有大量的炎癥細胞,壞死組織周圍可見到大量小鼠自身的B淋巴細胞,Group4組腫瘤組織內(nèi)可見更廣泛的壞死區(qū)域。(5)裸鼠局部組織見CD35、CD45RO及CD8陽性細胞浸潤。結(jié)論:l、HL60細胞較易形成白血病移植裸鼠模型。2、BCG能直接誘導(dǎo)DC成熟,增強其抗原遞呈功能。3、活BCG與滅活BCG有同樣誘導(dǎo)DC成熟的作用。4、經(jīng)
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