人臍帶血造血干細(xì)胞的分離和體外擴(kuò)增.pdf

1、從人類新鮮臍帶血(umbilical cord blood,UCB)中分離造血干細(xì)胞(hemopoietic stem cell,HSC);建立含有不同細(xì)胞因子的體外培養(yǎng)體系;將收集的UCB單個(gè)核細(xì)胞(MNC)在體外培養(yǎng);掌握體外HSC的擴(kuò)增方法;采用細(xì)胞活率計(jì)數(shù)法,形態(tài)學(xué)觀察法,流式細(xì)胞術(shù)(Flow cytometry,FCM)檢測(cè)UCB造血細(xì)胞表面標(biāo)志分子變化法,掌握UCB造血干細(xì)胞的生長規(guī)律.為建立UCB血庫和臨床移植治療一些成年

2、人惡性病積累必要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù).①體外人臍帶血HSC培養(yǎng)結(jié)果顯示,不同細(xì)胞因子組合會(huì)產(chǎn)生不同的擴(kuò)增效果,細(xì)胞因子對(duì)單個(gè)核細(xì)胞的增殖與擴(kuò)增有明顯的促進(jìn)作用.②不同細(xì)胞因子組合對(duì)細(xì)胞擴(kuò)增的總數(shù)也有顯著的差異性.SCF+IL-3+IL-6+TPO+FL對(duì)細(xì)胞總數(shù)擴(kuò)增最多.各組之間對(duì)細(xì)胞數(shù)的擴(kuò)增效果比較差異顯著(p<0.01).③流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)結(jié)果顯示,CD34<'+>造血干細(xì)胞在培養(yǎng)第14天達(dá)高峰,CD34<'+>細(xì)胞擴(kuò)增比較差異顯著(