氧化槐果堿的鎮(zhèn)痛作用及相關(guān)機制的研究.pdf

1、目的：觀察氧化槐果堿(Oxysophocarpine,OSC)的鎮(zhèn)痛作用并初步探討與OSC鎮(zhèn)痛作用相關(guān)的機制。
　　方法：采用行為藥理學方法、免疫組織化學和分子生物學技術(shù)探討OSC鎮(zhèn)痛作用及其作用機制。
　　1.行為藥理學方法:以小鼠溫浴熱甩尾甩尾潛伏期為指標觀察側(cè)腦室(Intra cerebroventricle injection,i.c.v.)、鞘內(nèi)(intrathecally,i.t.h.)等途徑給藥后OSC鎮(zhèn)痛作用

2、強度并初步分析其鎮(zhèn)痛作用的主要部位。②采用GABA受體相關(guān)激動劑和拮抗劑與OSC合用后鎮(zhèn)痛效果,研究其對OSC鎮(zhèn)痛作用的影響并分析OSC鎮(zhèn)痛作用機制。
　　2.免疫組織化學方法(SABC法),測定OSC對小鼠脊髓背角GABAARα1免疫陽性細胞數(shù)目的影響,分析OSC鎮(zhèn)痛作用與脊髓背角GABAARα1的關(guān)系。
　　3.Western blot方法檢測OSC對福爾馬林致痛小鼠大腦皮層、海馬GABAARα1蛋白含量的影響,分析大腦

3、皮層和海馬GABAARα1對OSC鎮(zhèn)痛作用的影響。
　　結(jié)果：1.不同給藥途徑對OSC鎮(zhèn)痛作用的影響與NS組比較,i.c.v.OSC1、4mg/kg可延長小鼠溫浴縮尾潛伏期(P<0.05,P<0.01),痛閾提高率最高可達34.66％;與NS組比較,i.t.h.OSC1和4mg/kg明顯延長小鼠溫浴縮尾潛伏期(P<0.05,P<0.01),痛閾提高率最高可達29.91%,且藥物持續(xù)時間較長。提示OSC在外周和中樞部位給藥均有鎮(zhèn)痛作

4、用,且中樞部位給藥鎮(zhèn)痛作用更明顯。
　　2.GABA及影響GABA受體藥物對OSC鎮(zhèn)痛作用的影響
　　與i.c.v.NS+OSC(6mg/kg,i.p.)組比較,i.c.v.γ-氨基丁酸(1.6mg/kg)+OSC(6mg/kg,i.p.)組和蠅蕈醇(0.1μg/只)+OSC(6mg/kg,i.p.)組可顯著加強閾下劑量OSC(6mg/kg,i.p.)在小鼠溫浴反應中的鎮(zhèn)痛作用,使小鼠痛閾明顯提高(P<0.05,P<0.01

5、);與i.c.v.NS+OSC(80mg/kg,i.p.)組比較,i.c.v.印防己毒素(0.2μg)+OSC(80mg/kg,i.p.)組及荷包牡丹堿(0.1μg/只)+OSC(80mg/kg,ip)組均可顯著對抗OSC(80mg/kg,i.p.)的鎮(zhèn)痛作用(P<0.05,P<0.01)。提示OSC的鎮(zhèn)痛作用與GABAA受體有關(guān)。
　　3.OSC對小鼠大腦皮層及海馬GABAARα1免疫陽性細胞及蛋白含量的影響。
　　與NS

6、組比較,i.p.OSC80mg/kg可顯著促進溫浴縮尾致痛小鼠大腦皮層和海馬GABAARα1蛋白的表達(P<0.01);與NS組比較,i.p.OSC80mg/kg可使小鼠大腦皮層及海馬GABAARα1免疫陽性細胞表達顯著增多(P<0.01);提示中樞GABAARα1參與了OSC的鎮(zhèn)痛作用。
　　結(jié)論：OSC具有明顯的鎮(zhèn)痛作用,其鎮(zhèn)痛作用有中樞和外周機制的共同參與。鎮(zhèn)痛作用部位主要涉及大腦皮質(zhì)及海馬等。其鎮(zhèn)痛機制可能與OSC刺激大腦