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1、目的:研究法尼酯衍生物X受體(FXR)在野百合堿(MCT)誘導(dǎo)的肺動(dòng)脈高壓(PAH)模型大鼠心肺組織中的表達(dá)及在PAH發(fā)病機(jī)制中的可能作用。
方法:(1)將70只SD大鼠隨機(jī)分為2組:正常對(duì)照組(Control組)和PAH模型組(MCT組),正常對(duì)照組大鼠按5 ml/kg單次腹腔注射無(wú)水乙醇生理鹽水溶液,PAH模型組大鼠按50 mg/kg單次腹腔注射MCT;分別于第4周末處死Control-4W組(n=18)和MCT-4W組(
2、PAH組,n=32)大鼠,第7周末處死Control-7W組(n=8)和MCT-7W組(PAH-右心衰組,n=12)大鼠。(2)驗(yàn)證模型構(gòu)建成功:①右心導(dǎo)管術(shù)檢測(cè)肺動(dòng)脈壓及右心室壓相關(guān)指標(biāo):肺動(dòng)脈收縮壓(PASP)、肺動(dòng)脈舒張壓(PADP)、平均肺動(dòng)脈壓(MPAP)及右心室收縮壓(RVSP);②計(jì)算右心室肥厚指數(shù)(RVHI);③蘇木素伊紅色(HE染色)、膠原纖維染色(Masson三色染色)、麥胚凝集素(WGA)熒光染色觀察肺血管重構(gòu)、心
3、室重構(gòu)。(3)檢測(cè)FXR在肺臟、心臟組織中的表達(dá):①RT-qPCR檢測(cè)FXR在肺臟、心室組織中的mRNA表達(dá)水平;②Western blot(WB)檢測(cè)FXR在肺臟、心室組織中的蛋白表達(dá)水平;③免疫組織化學(xué)技術(shù)(IHC)及免疫熒光技術(shù)(IF)檢測(cè)FXR在肺臟、心室組織中的蛋白表達(dá)水平及定位。(4) RT-qPCR檢測(cè)eNOS在MCT-4W組大鼠肺組織中的mRNA表達(dá)水平。
結(jié)果:(1)成功建立PAH及右心衰大鼠模型。(2) F
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