心理應激所致神經(jīng)內(nèi)分泌胸腺軸功能紊亂及中藥調節(jié)作用研究.pdf

1、本文運用現(xiàn)代研究方法和手段探討了心理應激對神經(jīng)-內(nèi)分泌-胸腺軸功能的影響。通過研究加味逍遙丸對神經(jīng)-內(nèi)分泌-胸腺軸的調節(jié)來分析其抗心理應激損傷的作用機理。是典型的由方藥探理的中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究，具有重要的科學意義和理論價值，具體表現(xiàn)在以下幾個方面。 應用電刺激心理應激箱誘發(fā)心理應激動物模型，用立早基因(c-Fos、c-Jun)二種蛋白為探針，研究了心理應激對中樞神經(jīng)系統(tǒng)即腦功能的影響以及加味逍遙丸的調節(jié)作用。研究發(fā)現(xiàn)心理應激后1h

2、，四個腦區(qū)(海馬、杏仁核、下丘腦室旁核、下丘腦視上核)c-Fos、c-Jun蛋白開始表達，3h達到高峰，隨即開始下降，其中c-Fos蛋白到應激后6h已回落近正常水平，而c-Jun蛋白在應激后6h仍然維持在相當于應激后1h的水平。我們在同一高峰點做了應激3次及應激5次實驗，c-Fos、c-Jun蛋白的表達仍維持在高峰水平。加味逍遙丸對腦區(qū)立早基因的調節(jié)是：c-Fos蛋白在用藥第三天杏仁核和下丘腦視上核表達減少，c-Jun蛋白在用藥第三天四

3、個腦區(qū)表達均減少，用藥第五天c-Fos、c-Jun蛋白在四個腦區(qū)表達都明顯減少，說明加味逍遙丸對心理應激小鼠腦區(qū)c-Fos、c-Jun蛋白表達有調節(jié)作用，可能于用藥第三天起作用。其阻斷下丘腦-垂體-腎上腺皮質軸(HPA軸)作用可能與其調節(jié)下丘腦等核團c-Fos、c-Jun蛋白有關。 用甲吡酮阻斷HPA軸，將加味逍遙丸與其對照研究，觀察血清糖皮質激素水平、胸腺細胞凋亡率、胸腺病理改變及細胞免疫功能狀況(NK細胞活性、淋巴細胞轉化率

4、)。研究發(fā)現(xiàn)心理應激小鼠表現(xiàn)為HPA軸功能紊亂，對免疫器官的結構和功能產(chǎn)生的影響是：胸腺指數(shù)下降，胸腺細胞凋亡率增加，NK細胞活性、淋巴細胞轉化率下降，胸腺組織病理發(fā)生輕度改變；用甲吡酮阻斷HPA軸后，慢性心理應激小鼠血清糖皮質激素水平下降，胸腺指數(shù)增加，胸腺細胞凋亡率下降，NK細胞活性增強，淋巴細胞轉化率升高，胸腺組織無明顯病理改變。加味逍遙丸的作用與甲吡酮阻斷HPA軸一致，推測加味逍遙丸對胸腺和細胞免疫功能的保護是通過阻斷HPA軸實

5、現(xiàn)的。 用六羥多巴胺(6-ohDA)阻斷交感腎上腺髓質軸(SA軸)，將加味逍遙丸與其對照研究，觀察指標與甲吡酮阻斷HPA軸相同，結果發(fā)現(xiàn)：應激組較對照組胸腺細胞凋亡率顯著升高、胸腺和脾臟指數(shù)明顯下降、胸腺有輕度病理損傷。服用加味逍遙丸組血清糖皮質激素水平下降，胸腺細胞凋亡率顯著下降，胸腺和脾臟指數(shù)明顯增加，病理損傷減輕，效果優(yōu)于六羥多巴胺阻斷SA軸組。其作用機制和六羥多巴胺阻斷交感神經(jīng)不完全一致。 根據(jù)以上研究，我們總結

6、出心理應激會導致神經(jīng)-內(nèi)分泌-胸腺軸功能紊亂，加味逍遙丸對該軸有調節(jié)作用。具體分析如下：首先心理應激引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)情緒相關腦區(qū)產(chǎn)生反應：立早基因(c-Fos、c-Jun)表達迅速增加，這些腦區(qū)主要包括下丘腦的核團、海馬區(qū)和杏仁核。腦區(qū)的改變會直接影響到內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能，造成HPA軸和SA軸功能紊亂。內(nèi)分泌系統(tǒng)會影響免疫系統(tǒng)的功能，出現(xiàn)胸腺萎縮、胸腺指數(shù)下降、胸腺細胞凋亡增加，細胞免疫功能(NK細胞活性、淋巴細胞轉化率)下降。

7、本研究在神經(jīng)、內(nèi)分泌、胸腺三個層次上對加味逍遙丸的作用機理加以探討，闡明了加味逍遙丸對中樞神經(jīng)系統(tǒng)立早基因(c-Fos、c-Jun)的表達有較強的調節(jié)作用；對HPA軸有調節(jié)作用，能降低血清糖皮質激素水平，其阻斷HPA軸作用可能與其調節(jié)下丘腦等核團立早基因(c-Fos、c-Jun)的表達有關；對胸腺結構和功能及細胞免疫功能有較強的保護作用。另外，通過實驗觀察還發(fā)現(xiàn)加味逍遙丸明顯改善慢性心理應激動物心理狀態(tài)，表現(xiàn)為理毛修飾、睡眠時間增多，進