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文檔簡介
1、目的:
梗阻性腎病(obstructive nephropathy,ON)是嬰兒和兒童腎臟衰竭最常見的原因。兒童梗阻性腎病占所有兒童終末期腎臟疾病(end-stage renal disease ESRD)的0.3%,占所有兒童腎移植的16.1%。在人類梗阻性腎病中,多數(shù)為不完全性梗阻。
梗阻性腎病造成腎臟細胞水平的改變主要分為三個廣義范疇:間質炎癥,腎小管凋亡和間質纖維化,三者之間相互交叉影響,最終導致腎小
2、管萎縮、間質纖維化和腎單位喪失,因此,為了最大限度的減輕腎臟損害,應該在腎臟發(fā)生不可逆損傷之前解除梗阻。國外已經(jīng)有學者制作了輸尿管部分梗阻的動物模型,在輸尿管梗阻后不同時間點解除梗阻,研究表明腎臟受損傷的程度和梗阻持續(xù)時間及梗阻的嚴重程度成正比,及時解除梗阻后腎小管萎縮、腎間質纖維化等病理改變可以部分逆轉,可以減少腎單位的丟失。
本實驗通過已經(jīng)制作成功的具有高度重復性和一致性的輸尿管部分梗阻動物模型,研究輸尿管部分梗阻后不
3、同時間點腎臟病理改變規(guī)律及發(fā)生的時空特點,并在不同時間點解除梗阻,探討腎臟發(fā)生不可逆損傷的確切病理時相,為進一步篩選診斷腎臟不可逆損傷標志物奠定基礎,為梗阻性腎病以及其它慢性腎臟疾病腎損傷選擇最佳治療時機具有重要的意義。
材料與方法:
選擇2月齡SD大鼠144只,隨機分為部分輸尿管梗阻組(PUUO組)和對照組(Sham組),PUUO組又以術后1天、3天、5天、7天、14天分為五組,PUUO組術后1天、3天、5
4、天組再以解除梗阻后0、1、3、5、7天各分為五組。每組8只SD大鼠。PUUO組在無菌條件下,經(jīng)腹切口行左側輸尿管部分結扎術,Sham組為正常腎臟。取患側腎臟,測量大體標本,多聚甲醛固定,石蠟包埋行HE染色、膠原纖維染色及免疫組化染色觀察腎臟的病理改變。
結果:
一、輸尿管部分梗阻后病理改變
1、大體病理改變
Sham組:腎臟未見異常。PUUO組:梗阻后1天出現(xiàn)腎盂擴張,3天腎臟增大
5、,腎實質變薄,腎盞乳頭受壓,穹窿部乳頭變平鈍,部分成凹形,隨梗阻時間延長,乳頭萎縮逐漸加重,腎盂擴張程度逐漸加重,腎皮質逐漸變薄。
2、HE染色結果
Sham組:腎臟未見病理改變。PUUO組:隨梗阻時間延長,腎小管損害進行性加重。PUUO術后1天上皮細胞水腫,偶見小管擴張,3天出現(xiàn)部分腎小管輕度擴張,5天可見腎小管擴張明顯,7天腎小管擴張更加明顯,上皮細胞萎縮。14天大部分腎小管明顯擴張,上皮細胞萎縮。
6、> 3、膠原纖維染色結果
Sham組:腎臟未見膠原纖維沉積。PUUO組:梗阻1天腎臟可見少量膠原纖維沉積,隨著梗阻時間的延長,膠原纖維沉積逐漸增加。
4、免疫組化結果
Sham組:未見ED-1及TGF-β1表達,血管周圍可見α-SMA表達,其余部位未見α-SMA表達,可見E-cadherin大量表達。
PUUO組:梗阻后1天、3天、5天、7天腎小球及腎小管周圍ED1表達逐漸增
7、加,14天ED1表達減少。梗阻后1天、3天、5天腎小球內(nèi)可見ED1表達,梗阻后7天偶見腎小球內(nèi)ED1表達、14天腎小球內(nèi)未見ED1表達,組間比較均有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。
隨著梗阻時間的延長,α-SMA及TGF-β1表達逐漸增加,E-cadherin表達逐漸減少,組間比較均有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。
二、輸尿管部分梗阻解除之后病理改變
1、HE染色結果
PUUO術后1天解
8、除梗阻,上皮細胞水腫逐漸消失,小管擴張減輕。PUUO術后3天、5天解除梗阻,腎小管仍逐漸擴張,上皮細胞萎縮。
2、膠原纖維染色結果
PUUO術后1天解除梗阻,隨著時間的延長,膠原纖維沉積逐漸減少,PUUO術后3天、5天解除梗阻,膠原纖維表達仍然逐漸增加。
3、免疫組化
PUUO術后1天解除梗阻,隨著時間的延長,α-SMA及TGF-β1表達逐漸下降,E-cadherin表達逐漸增加,
9、至解除梗阻后第7天α-SMA呈陰性表達,TGF-β1僅有少量表達,E-cadherin表達進行性增加。PUUO術后3天、5天解除梗阻,α-SMA及TGF-β1表達仍然持續(xù)增加,E-cadherin表達進行性減少。組間比較有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。
結論:
1、PUUO組大鼠,梗阻后24小時腎臟即發(fā)生病理改變,隨著梗阻時間的延長,病理改變逐漸加重,腎小管上皮逐漸擴張、萎縮,可見腎間質中炎性細胞浸潤逐漸增加,
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