PCSK9基因單核苷酸多態(tài)性與冠心病的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(簡(jiǎn)稱冠心病，coronary artery disease，CAD)是一種威脅人體健康的重要疾病，其發(fā)病率和死亡率逐年上升。流行病學(xué)調(diào)查顯示冠心病與多種遺傳因素有關(guān)，尤其是參與脂代謝的多個(gè)基因在冠心病的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用，這是因?yàn)檠蓙y是導(dǎo)致冠心病發(fā)生發(fā)展病理演變的必要前提。前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草桿菌蛋白酶/西布曲明9a型(porprotein convertase subtilisin/kexin 9，PCS

2、K9)是新近發(fā)現(xiàn)的涉及常染色體顯性高膽固醇血癥(Autosomal-dominant hypercholesterolemia，ADH)的第三個(gè)基因。ADH以高血漿LDL水平為主要特點(diǎn)，被認(rèn)為是冠心病的風(fēng)險(xiǎn)因子。 隨著人類基因組測(cè)序的完成，研究與疾病表型相關(guān)的序列變異已成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的一個(gè)主要課題。單核苷酸多態(tài)性(Single-nucleotidepolymorphism,SNP)作為第三代遺傳標(biāo)記，具有數(shù)量大，分布廣的特點(diǎn)。在群

3、體水平上系統(tǒng)地篩查鑒定SNP，特別是編碼區(qū)和基因調(diào)控區(qū)的SNP，并通過(guò)病例一對(duì)照研究(case-control study)，有可能獲得與疾病相關(guān)聯(lián)的SNP位點(diǎn)或單倍型。這對(duì)于闡明某些復(fù)雜的多基因疾病發(fā)病機(jī)理具有重要意義。 本課題通過(guò)對(duì)中國(guó)四川地區(qū)漢族CAD患者和正常個(gè)體中PCSK9基因已知SNP的研究，比較它在CAD患者和正常對(duì)照人群中的分布、與血脂水平的關(guān)系、與冠心病病變嚴(yán)重程度以及預(yù)后情況，以期揭示PCS：K9基因與脂代謝

4、紊亂及冠心病的關(guān)系，并闡明其在冠心病發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后中的作用。 首先，我們采用聚合酶鏈反應(yīng)一限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(polymerasechain reaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP)方法研究了四川地區(qū)漢族人群中184例正常人和212例CAD患者PCSK9基因的已知SNP位點(diǎn)E670G(23968A>G)的分布頻率，并初步探討了它與脂代謝及冠心病的關(guān)

5、系。其后，用PCR-RFLP方法進(jìn)行分析，通過(guò)測(cè)序進(jìn)行驗(yàn)證。然后，對(duì)該SNP與脂代謝和CAD的相關(guān)性進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 對(duì)已知SNP位點(diǎn)(E670G)的研究結(jié)果顯示，中國(guó)四川地區(qū)漢族健康人群中該等位基因的頻率分別為94.3％(23968A)和5.7％(23968G)，而CAD患者組中分別為87.7％(23968A)和12.3％(23968G)；根據(jù)國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道，在北美CAD患者人群中，兩種等位基因的頻率分別為94.4％(2396

6、8A)和5.6％(23968G)；而在德國(guó)CAD患者人群中，兩種等位基因的頻率分別為94.2％(23968A)和5.8％(23968G)，；經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，中國(guó)四川地區(qū)漢族人群CAI)患者與歐美CAD患者人群相比，該位點(diǎn)等位基因頻率分布明顯升高，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；基因型頻率方面相比較，也有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。中國(guó)四川地區(qū)漢族人群中，CAD患者間該位點(diǎn)等位基因頻率分布較健康人群明顯升高，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，