TGF-β1在滑膜肉瘤中的作用及其促轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究.pdf

1、目的:檢測TGF-β1在滑膜肉瘤中的表達(dá),分析它在滑膜肉瘤發(fā)生發(fā)展中的作用,并探討其促進(jìn)滑膜肉瘤轉(zhuǎn)移的可能機(jī)制。
　　 方法:
　　 1.分析滑膜肉瘤中TGF-β1的表達(dá)及其與SYT-SSX融合基因的關(guān)系。收集天津醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院2005-2009年凍存的新鮮滑膜肉瘤組織標(biāo)本35例,利用RT-PCR技術(shù)檢測滑膜肉瘤的SYT-SSX亞型,應(yīng)用Real-time PCR技術(shù)檢測TGF-β1 mRNA的表達(dá),分析TGF-β

2、1 mRNA表達(dá)與SYT-SSX亞型的關(guān)系。篩選1974-2005年經(jīng)手術(shù)切除石蠟包埋的滑膜肉瘤組織標(biāo)本140例,使用免疫組化技術(shù)檢測TGF-β1蛋白的表達(dá),RT-PCR檢測SYT-SSX亞型,分析TGF-β1蛋白表達(dá)與SYT-SSX亞型的關(guān)系。
　　 2.收集140例滑膜肉瘤的臨床病理資料和隨訪資料,回顧性分析TGF-β1表達(dá)與患者臨床病理參數(shù)及總體生存、無轉(zhuǎn)移生存之間的關(guān)系,探討TGF-β1在滑膜肉瘤發(fā)生發(fā)展中的作用。

3、>　　 3.在滑膜肉瘤石蠟包埋組織中,使用免疫組化方法檢測CD31、MMP-2、TIMP-2、MMP-9、TIMP-1的表達(dá),分析微血管密度(MVD)、基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑與腫瘤轉(zhuǎn)移及患者總體生存、無轉(zhuǎn)移生存的關(guān)系,進(jìn)而分析它們與TGF-β1的關(guān)系,探討TGF-β1促進(jìn)滑膜肉瘤轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制。
　　 結(jié)果:
　　 1.TGF-β1在滑膜肉瘤中的表達(dá)及其與SYT-SSX融合基因的關(guān)系新鮮滑膜肉瘤組織中檢測到TGF-β

4、1的mRNA表達(dá)量平均為0.154±0.110。在110例(78.6％)滑膜肉瘤石蠟包埋組織中檢測到TGF-β1蛋白的表達(dá),其中49例高表達(dá),61例低表達(dá)。TGF-β1在SYT-SSX1型和SYT-SSX2型新鮮滑膜肉瘤組織中的mRNA表達(dá)量分別為0.2385±0.1214和0.2385±0.1214,前組明顯高于后組。同樣,在140例石蠟包埋組織中TGF-β1蛋白的表達(dá)與SYT-SSX亞型有關(guān)(t=2.093,P=0.004),SYT

5、-SSX1型滑膜肉瘤(4.3265±2.0350)中TGF-β1蛋白的表達(dá)明顯高于SYT-SSX2型滑膜肉瘤(3.4187±1.6019)。
　　 2.TGF-β1與臨床病理參數(shù)及患者生存的關(guān)系TGF-β1的表達(dá)與滑膜肉瘤的組織學(xué)分型、臨床分期、轉(zhuǎn)移有關(guān),在雙相型、臨床晚期、轉(zhuǎn)移性滑膜肉瘤中的表達(dá)明顯高于單相型、臨床早期和非轉(zhuǎn)移性滑膜肉瘤。TGF-β1的表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤的部位、大小、組織學(xué)分級無關(guān)。
　　 單

6、因素生存分析結(jié)果顯示,患者的年齡、腫瘤大小、病理學(xué)分級、臨床分期、放療、轉(zhuǎn)移、TGF-β1是影響患者總體生存的危險(xiǎn)因素,而性別、腫瘤部位、組織學(xué)分型、化療與患者的總體生存無關(guān)。多因素分析結(jié)果顯示,TGF-β1的表達(dá)、腫瘤大小和臨床分期是影響滑膜肉瘤患者總體生存的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
　　 單因素分析影響滑膜肉瘤患者無轉(zhuǎn)移生存的因素,結(jié)果表明,患者的年齡、放療、組織學(xué)分級、TGF-β1的表達(dá)與滑膜肉瘤的無轉(zhuǎn)移生存有關(guān),而性別、腫瘤大小、

7、部位、組織學(xué)分型、化療與滑膜肉瘤患者的無轉(zhuǎn)移生存無關(guān)。多因素分析結(jié)果顯示TGF-β1、患者年齡、組織學(xué)分級是影響滑膜肉瘤患者無轉(zhuǎn)移生存的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
　　 3.基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑和微血管密度與滑膜肉瘤轉(zhuǎn)移及TGF-β1表達(dá)的關(guān)系MMP-2、MMP-9高表達(dá)滑膜肉瘤的轉(zhuǎn)移發(fā)生率明顯高于低表達(dá)組,而TIMP-2、TIMP-1與是否發(fā)生轉(zhuǎn)移無顯著關(guān)系。并且,MMP-2、MMP-9高表達(dá)患者的總體生存較差,無轉(zhuǎn)移生存較差,而TI

8、MP-2、TIMP-1的表達(dá)與患者的總體生存和無轉(zhuǎn)移生存無關(guān)。
　　 相關(guān)性分析結(jié)果顯示,TGF-β1與MMP-2、MMP-9的表達(dá)成正相關(guān)關(guān)系,而TIMP-2、TIMP-1與TGF-β1的表達(dá)無關(guān)。
　　 140例滑膜肉瘤的MVD為50.0±18.6個(gè)/HPF。MVD與滑膜肉瘤的轉(zhuǎn)移無關(guān),與患者的總體生存和無轉(zhuǎn)移生存無關(guān)。TGF-β1表達(dá)與MVD成正相關(guān)關(guān)系。
　　 結(jié)論:
　　 1.在大多數(shù)滑膜肉瘤中

9、存在TGF-β1的表達(dá)。
　　 2.結(jié)合前期研究結(jié)果,TGF-β1可能是SYT-SSX的一個(gè)下游基因,可能在SYT-SSX的調(diào)控下影響滑膜肉瘤的發(fā)生和進(jìn)展。
　　 3.TGF-β1可能促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移,進(jìn)而影響患者的總體生存和無轉(zhuǎn)移生存。
　　 4.TGF-β1可能通過上調(diào)MMP-2、MMP-9的表達(dá),促進(jìn)滑膜肉瘤的轉(zhuǎn)移。
　　 5.雖然TGF-β1可以促進(jìn)滑膜肉瘤血管的生成,但是后者與腫瘤的轉(zhuǎn)移沒有直接關(guān)