異丙酚對大鼠失血性休克合并內(nèi)毒素血癥致肝損傷的保護.pdf

1、目的：探討氧化應(yīng)激在大鼠失血性休克合并內(nèi)毒素血癥致急性肝損傷中的作用；同時，觀察異丙酚對這一病理過程的影響。 方法：以健康SD大鼠為實驗對象，制作大鼠失血性休克合并內(nèi)毒素血癥模型。56只動物隨機均分為七組：創(chuàng)傷前組(n=8)，此組單純給予氣管插管、機械通氣、股動脈和股靜脈置管，不施以失血性休克和內(nèi)毒素注射，完成以上操作后立即取標(biāo)本、活殺，以此組測得的數(shù)據(jù)作為其它組的基礎(chǔ)值；假手術(shù)2小時組(n=8)，單純給予氣管插管、機械通氣、股

2、動脈和股靜脈置管，不施以失血性休克和內(nèi)毒素注射，以上操作完成后6小時，取標(biāo)本、活殺；假手術(shù)4小時組(n=8)，單純給予氣管插管、機械通氣、股動脈和股靜脈置管，不施以失血性休克和內(nèi)毒素注射，以上操作完成后8小時，取標(biāo)本、活殺；失血性休克合并內(nèi)毒素血癥2小時組(創(chuàng)傷2小時組，n=8)，施以失血性休克、復(fù)蘇后，給予內(nèi)毒素注射，2小時后取標(biāo)本、活殺，在施以失血性休克之前30分鐘開始，以0.3m1/kg/h的速率由微量泵持續(xù)輸入生理鹽水；失血性休

3、克合并內(nèi)毒素血癥4小時組(創(chuàng)傷4小時組，n=8)，施以失血性休克、復(fù)蘇后，給予內(nèi)毒素注射，4小時后取標(biāo)本、活殺，于施以失血性休克之前30分鐘開始，以0.3ml/kg/h的速率由微量泵持續(xù)輸入生理鹽水；異丙酚治療2小時組(異丙酚2小時組，n=8)，在施以失血性休克之前30分鐘開始以10mg/kg/h的速率持續(xù)輸入異丙酚，在施以失血性休克、復(fù)蘇后，給予內(nèi)毒素注射，2小時后取標(biāo)本、活殺；異丙酚治療4小時組(異丙酚4小時組，n=8)，在施以失血

4、性休克之前30分鐘開始以10mg/kg/h的速率持續(xù)輸入異丙酚，在施以失血性休克、復(fù)蘇后，給予內(nèi)毒素注射，4小時后取標(biāo)本、活殺。檢測指標(biāo)：以血漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的活性作為評價肝損傷的指標(biāo)；以肝組織中丙二醛(MDA)的含量代表脂質(zhì)過氧化物的含量、總超氧化物歧化酶(SOD)的活性作為機體清除氧自由基能力的指標(biāo)。 結(jié)果：假手術(shù)組ALT活性、MDA含量和總SOD活性在各時間點均處于一種平穩(wěn)狀態(tài)。在創(chuàng)傷組，與創(chuàng)傷前組和假手術(shù)組同時間

5、點相比，ALT活性、MDA含量在給予內(nèi)毒素后2小時、4小時明顯升高(P＜0.05)，4小時組高于2小時組(P＜0.05)。在異丙酚組，與創(chuàng)傷前組和假手術(shù)組同時間點相比，ALT活性、MDA含量在給予內(nèi)毒素2小時、4小時后略有升高(P＜0.05)，4小時組與2小時組相比差異不明顯(P＞0.05)；與創(chuàng)傷組同時間點相比較，ALT活性、MDA含量在給予內(nèi)毒素2小時、4小時后明顯降低(P＜0.05)?？係OD活性與MDA含量的變化呈相反趨勢。

6、 結(jié)論：本研究結(jié)果顯示，失血性休克合并內(nèi)毒素血癥時，氧化代謝產(chǎn)物MDA大量產(chǎn)生，總SOD活性降低，同時肝損傷指標(biāo)(ALT)升高，提示失血合并感染致肝損傷中，氧化-抗氧化系統(tǒng)的失衡是其重要因素；異丙酚可通過其抗氧化作用顯著減輕急性肝損傷的程度，起到一定的保護作用。 實驗二異丙酚對大鼠失血性休克合并內(nèi)毒素血癥致急性肝損傷時肝細(xì)胞凋亡因子表達的調(diào)控目的：觀察大鼠失血性休克合并內(nèi)毒素血癥致急性肝損傷時肝細(xì)胞凋亡因子Bax和Bcl-2

7、表達的改變，以及異丙酚對這些變化的影響，探討異丙酚對失血合并感染機體肝損傷保護的一些機制。 方法：以健康SD大鼠為實驗對象，制作大鼠失血性休克合并內(nèi)毒素血癥模型。56只動物隨機均分為七組：創(chuàng)傷前組(n=8)，此組單純給予氣管插管、機械通氣、股動脈和股靜脈置管，不施以失血性休克和內(nèi)毒素注射，以上操作完成后立即取標(biāo)本、活殺以此組測得的數(shù)據(jù)作為其他組的基礎(chǔ)值；假手術(shù)2小時組(n=8)，單純給予氣管插管、機械通氣、股動脈和股靜脈置管，不

8、施以失血性休克和內(nèi)毒素注射，以上操作完成后6小時，取標(biāo)本、活殺；假手術(shù)4小時組(n=8)，單純給予氣管插管、機械通氣、股動脈和股靜脈置管，不施以失血性休克和內(nèi)毒素注射，以上操作完成后8小時，取標(biāo)本、活殺；失血性休克合并內(nèi)毒素血癥2小時組(創(chuàng)傷2小時組，n=8)，施以失血性休克、復(fù)蘇后，給予內(nèi)毒素注射2小時后取標(biāo)本、活殺，在施以失血性休克之前30分鐘開始，以0.3ml/kg/h的速率由微量泵持續(xù)輸入生理鹽水；失血性休克合并內(nèi)毒素血癥4小時

9、組(創(chuàng)傷4小時組，n=8)，施以失血性休克、復(fù)蘇后，給予內(nèi)毒素注射，4小時后取標(biāo)本、活殺，于施以失血性休克之前30分鐘開始，以0.3ml/kg/h的速率由微量泵持續(xù)輸入生理鹽水；異丙酚治療2小時組(異丙酚2小時組，n=8)，于施以失血性休克之前30分鐘開始以10mg/kg/h的速率持續(xù)輸入異丙酚，在施以失血性休克、復(fù)蘇后，給予內(nèi)毒素注射，2小時后取標(biāo)本、活殺；異丙酚治療4小時組(異丙酚4小時組，n=8)，于施以失血性休克之前30分鐘，開

10、始以10mg/kg/h的速率持續(xù)輸入異丙酚，在施以失血性休克、復(fù)蘇后，給予內(nèi)毒素注射，4小時后取標(biāo)本、活殺。觀察指標(biāo)：肝組織病理切片；采用免疫組織化學(xué)法測定凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達。 結(jié)果：(1)光鏡下創(chuàng)傷組和異丙酚組與創(chuàng)傷前組和假手術(shù)組比較，肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂，肝細(xì)胞普遍有水腫變性、空泡變性，異丙酚組與創(chuàng)傷組相比，上述改變明顯減輕。(2)各組動物肝臟細(xì)胞內(nèi)均有Bax和Bcl-2的表達。假手術(shù)組Bcl-2和Bax的表達及Ba

11、x/Bcl-2比值在各時間點均處于一種平穩(wěn)狀態(tài)。在創(chuàng)傷組，與創(chuàng)傷前組和假手術(shù)組同時間點相比，Bcl-2的表達在給予內(nèi)毒素后2小時、4小時組明顯降低(P＜0.05)，4小時組低于2小時組(P＜0.05)；而Bax的表達和Bax/Bcl-2比值，創(chuàng)傷組與創(chuàng)傷前組和假手術(shù)組同時間點相比，在給予內(nèi)毒素后2小時、4小時則明顯增加(P＜0.05)，4小時組高于2小時組(P＜0.05)。在異丙酚組，與創(chuàng)傷前組和假手術(shù)組同時間點相比，Bcl-2的表達在

12、給予內(nèi)毒素2小時、4小時后略有降低(P＜0.05)，4小時組與2小時組相比差異不明顯(P＞0.05)，與創(chuàng)傷組同時間點相比較，Bcl-2表達在給予內(nèi)毒素2小時、4小時后升高明顯(P＜0.05)；而Bax的表達和Bax/Bcl-2比值，異丙酚組與創(chuàng)傷前組和假手術(shù)組同時間點相比，在給予內(nèi)毒素后2小時、4小時則略有升高(P＜0.05)，4小時組與2小時組相比差異不明顯(P＞0.05)，與創(chuàng)傷組同時間點相比較，Bax表達和Bax/Bcl-2比值