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1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(Transfoyminggrowthfactoβ1,TGF-β1)是肝纖維化形成中重要的細(xì)胞因子,體內(nèi)多種細(xì)胞如淋巴細(xì)胞、血小板、巨噬細(xì)胞等均可合成與分泌TGF-β1。目前已明確肝纖維化時(shí)細(xì)胞外基質(zhì)(Hepaticextracel-lularmatrix,ECM)的合成與分泌主要由TGF-β1介導(dǎo),TGF-β1是強(qiáng)效致纖維化因子。目前國(guó)內(nèi)關(guān)于血漿TGF-β1檢測(cè)與肝纖維化的研究較少,且評(píng)價(jià)不一。
2、 研究目的 觀察慢性病毒性肝炎患者不同時(shí)期血漿TGF-β1水平及肝膠原含量,探討TGF-β1與肝纖維化分期的關(guān)系。 實(shí)驗(yàn)方法 1.病例選擇選擇2004年6月-2005年4月住院的慢性乙型肝炎患者89例,所有病例經(jīng)肝組織病理確診,診斷符合2000年全國(guó)病毒性肝炎防治方案慢性肝炎炎癥分級(jí)(Grade,G)、纖維化分期(Stage,S)標(biāo)準(zhǔn),并選健康體檢正常者16例做為正常對(duì)照。 2.血漿TGF-β1檢測(cè)于肝
3、穿活檢前3天內(nèi)空腹抽血,肝素鈉抗凝,離心,分離新鮮血漿,-20度冰凍保存,采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)TGF-β1水平。 3.病理制片及分析B超定位下肝活檢,采取負(fù)壓吸引法,肝穿標(biāo)本以10%甲醛固定,石蠟包埋,連續(xù)切片,常規(guī)HE染色、并做Masson三色染色及Gordon-Sweets浸銀染色,光鏡下觀察匯管區(qū)、肝小葉和中央靜脈等結(jié)構(gòu)并進(jìn)行綜合判斷,做出炎癥分級(jí)(G:0-4)及纖維化分期(S:0-4)的診斷,采用多媒體圖像系統(tǒng)
4、對(duì)Masson染色標(biāo)本進(jìn)行膠原定量測(cè)定,分析慢性病毒性肝炎患者纖維化各期血漿TGF-β1水平及與膠原纖維量的相關(guān)性。 4.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法t檢驗(yàn)、直線相關(guān)分析. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 慢性病毒性肝炎患者血漿TGF-β1(ng/ml)水平顯著高于正常血漿對(duì)照組(4.8±2.1,p<0.01),TGF-β1水平隨纖維化分期從S0-S4逐步升高(9.1±2.7,11.8±2.9,,16.1±4.9,21.2±6.0,27.0±6.8),
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