過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）配體對胃癌細胞MCG-803生長及基因表達的研究.pdf

1、目的：研究過氧化物酶體增殖物激活受體(PPARγ)配體吡格列酮對人胃癌細胞株MCG-803增殖和凋亡的影響，了解人胃癌細胞株MCG-803中PPARγ表達水平及其調控細胞生長的可能作用。 方法：采用不同濃度過氧化物酶體增殖物激活受體PPARγ配體吡格列酮分別作用于人胃癌細胞株MCG-803，分組為：陰性對照組、0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、50μmol/L和100μmol/L共7組；

2、再應用四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)檢測24、48、72h時胃癌細胞株MCG-803細胞增殖狀態(tài)。根據(jù)PPARγ配體吡格列酮作用于人胃癌細胞株MCG-803的濃度不同，分組為：陰性對照組、0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、50μmol/L共5組；再利用雙染色(AnnexinV/PI)流式細胞術檢測孵育48h時胃癌細胞株MCG-803細胞凋亡率。根據(jù)PPARγ配體吡格列酮作用于人胃癌細胞株MCG-803的濃度不同，分組

3、為：陰性對照組、0.1μmol/L、10μmol/L、100μmol共4組；進一步采用熒光定量PCR法(RT-PCR)測定孵育48h時PPARγ在胃癌細胞株MCG-803中的基因表達。 結果： 1.MTT法檢測0.01、0.1、1μmol/L吡格列酮孵育人胃癌細胞株MCG-80324h時與對照組相比，增殖無明顯影響，無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，10、50、100μmol/L吡格列酮則均可顯著抑制MCG-803細胞增殖，

4、有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，隨著作用時間延長到72h，0.1μmol/L組也開始呈現(xiàn)細胞生長抑制效應，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，24h時50μmol/L組增殖抑制作用強于10μmol/L組，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，作用48h時10μmol/L組增殖抑制作用強于1μmol/L組，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，72h時0.1μmol/L組增殖抑制作用強于0.01μmol/L組，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)； 2.雙染色(

5、AnnexinV/PI)流式細胞術檢測(0.1、1、10、50μmol/L)孵育胃癌細胞株MCG-803細胞48h后凋亡率與對照組相比顯著增加，有統(tǒng)計學差異(P＜0.01，P=0.001)。隨著吡格列酮濃度增加，細胞凋亡也增加，但無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。 3.熒光定量PCR法(RT-PCR)檢測不同濃度吡格列酮(0.1、10、100μmol/L)孵育48h時PPARγ基因在胃癌細胞株MCG-803中表達發(fā)現(xiàn)，隨著吡格列酮藥