順鉑腎毒性生化與分子機(jī)理研究.pdf

1、由于順鉑在耗竭細(xì)胞-SH的同時(shí)還可抑制抗氧化物酶活性,破壞了氧自由基代謝的平衡狀態(tài),引發(fā)氧化反應(yīng)激,使腎小管細(xì)胞產(chǎn)生氧化性損傷.該研究還將氧化性損傷在順鉑腎毒性中的作用進(jìn)行研究.第一部分;氧化性損傷在順鉑腎毒性中的作用.目的;采用體外培養(yǎng)的豬腎小管細(xì)胞系LLC-PK1,考察順鉑引起的細(xì)胞內(nèi)氧自由基的改變,并應(yīng)用抗氧化物消除自由基的產(chǎn)生,結(jié)合順鉑的細(xì)胞毒性,研究氧化性損傷在順鉑腎素性中的作用.結(jié)論:1、順鉑可以使細(xì)胞內(nèi)氧自由基產(chǎn)生增高,提

2、示順鉑可引起氧化性損傷,.但自由基增高發(fā)生在3小時(shí)之內(nèi),工未隨順鉑作用時(shí)間的延長(zhǎng)而持續(xù)增高.2、NAC、DFO和DMSO都有效地預(yù)防順鉑引起的氧自由基的增高,但只有NAC能夠預(yù)防順鉑細(xì)胞毒性.3、NAC能與順鐵結(jié)合而滅活順鉑,從而具有理想的預(yù)防作用.DFO與DMSO雖然能清除自由基,卻不能預(yù)防順鉑細(xì)胞毒性,提示氧化性損傷不是順鉑所致毒性的主要原因.第二部分順鉑對(duì)蛋白酶體抑制作用的研究.目的:研究順鉑對(duì)蛋白酶體的抑制作用及其與凋亡的關(guān)系.

3、結(jié)論:1、順鉑對(duì)蛋白酶體有一定的抑制作用,但它不是蛋白酶體的特異的抑制劑,抑制作較強(qiáng).2、p53的表達(dá)變化并不能完全用蛋白酶體抑制解釋,順鉑可能同時(shí)影響了p53表達(dá)的其它環(huán)節(jié),但順鉑作用細(xì)胞早期p53的表達(dá)增高可能與蛋白酶的體的抑制有關(guān).3、順鉑對(duì)蛋白酶體的抑制作用可能參與了調(diào)亡的發(fā)生.第三部分ERCC1表達(dá)載體的構(gòu)建及其在腎細(xì)胞中的表達(dá).目的:構(gòu)建ERCC1表達(dá)載體并在腎細(xì)胞中表達(dá);初步觀察順鉑對(duì)ERCC1過(guò)表達(dá)腎細(xì)胞的毒性變化.結(jié)論