在小鼠中EGCG可通過抑制凋亡途徑來減輕順鉑所致的腎毒性.pdf

1、研究背景:
　　順鉑(cisplatin，CP)是一種鉑類化合物，是近40年來腫瘤治療藥物的重大發(fā)現(xiàn)之一，主要作用部位在DNA的嘌呤和嘧啶堿基。CP屬于細(xì)胞周期非特異性藥物，在其抑制癌細(xì)胞DNA復(fù)制過程的同時(shí)還可損傷其細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，故其除了具有抗癌作用外，還具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性。臨床上，CP廣泛應(yīng)用于各種實(shí)體腫瘤，如前列腺癌、卵巢癌等生殖系統(tǒng)腫瘤，肺癌、鼻咽癌等呼吸系統(tǒng)腫瘤，食管癌等消化系統(tǒng)腫瘤，以及內(nèi)分泌腫瘤、血液系統(tǒng)腫瘤等。

2、CP抗癌譜廣、作用強(qiáng)，且與多種抗腫瘤藥物具有協(xié)同作用而無交叉耐藥，為當(dāng)前臨床化療中最常用的藥物之一。但是，CP副作用大，其最主要的副作用——腎毒性，發(fā)生于接受CP化療的近三分之一患者，呈現(xiàn)劑量、時(shí)間相關(guān)性。CP所致腎毒性最常見且最嚴(yán)重的后果就是急性腎損傷（acute kidney injury，AKI），在小鼠中主要見于腎近端小管。CP引發(fā)的AKI所涉及的機(jī)制包括有氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)和腎小管細(xì)胞凋亡，而后者被視為最關(guān)鍵的機(jī)制。表沒食子兒

3、茶素沒食子酸酯（Epigallocatechin-3-gallate，EGCG），是一種兒茶素類單體，主要從綠茶中提取獲得。EGCG是茶多酚生物活性的主要成份，具有抗氧化、抗炎、抗突變等活性特點(diǎn)。EGCG主要表現(xiàn)為強(qiáng)大的自由基清除能力，其突出的抗氧化活性，是維生素C的100多倍，是維生素E的25倍，具有顯著的細(xì)胞保護(hù)作用及潛在的抗癌效應(yīng)。近期多項(xiàng)研究已證實(shí)，EGCG可緩解多種腫瘤的進(jìn)展。CP所致的AKI主要表現(xiàn)為腎小管上皮細(xì)胞的凋亡，其

4、中所涉及的機(jī)制復(fù)雜，諸多研究表明，其機(jī)制包括由死亡受體如TNF或Fas介導(dǎo)的細(xì)胞外途徑、線粒體途徑和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激等。基于EGCG的抗氧化、抗炎、抗腫瘤等作用，本研究旨在探索EGCG能否減輕CP所致的腎毒性及其所涉及的機(jī)制。
　　研究目的:
　　建立CP誘導(dǎo)的AKI模型，用EGCG進(jìn)行干預(yù)，探索EGCG能否減輕CP所致的腎毒性及其所涉及的機(jī)制。
　　研究方法:
　　成年雄性的C57/BL6小鼠被隨機(jī)分為以下四組:1）

5、對(duì)照組(NC組):腹腔注射生理鹽水10ml/kg;2）EGCG組:腹腔注射EGCG100mg/kg（以生理鹽水配備，藥物濃度為20mg/ml);3）CP組:腹腔注射CP20mg/kg（以生理鹽水配備，藥物濃度為2mg/ml）;4)CP+EGCG組:EGCG100mg/kg腹腔注射30min后給予CP20mg/kg腹腔注射，48h后再次補(bǔ)充EGCG100mg/kg腹腔注射。5天后，稱體重，處死小鼠。動(dòng)物模型順利建成后，以檢測血清生化指標(biāo)變

6、化、組織切片病理染色、TUNEI凋亡檢測、Western blot、免疫組化等實(shí)驗(yàn)技術(shù)從分子水平探討EGCG的干擾作用及相關(guān)機(jī)制。
　　結(jié)果:
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，EGCG能明顯減輕CP所致的腎組織損傷及血肌酐和尿素氮水平的增高;相比于CP組，CP+EGCG組的TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)也明顯減少;同時(shí)，EGCG還能下調(diào)Fas-L、Bax和p53的表達(dá)，并上調(diào)Bcl-2的表達(dá)。
　　結(jié)論:
　　這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果均證明，EGC