VIP對NKG2D信號途徑的影響在胃癌免疫逃逸中的作用研究.pdf

1、研究背景:
　　 胃癌是消化道最常見的惡性腫瘤,而體細(xì)胞癌變后必須逃逸機(jī)體的免疫殺傷才能存活,其中自然殺傷細(xì)胞中的NKG2D活化性受體在這一免疫監(jiān)視功能中起著關(guān)鍵性的作用。以往的研究提示胃癌患者NKG2D表達(dá)下降,參與機(jī)體免疫抑制的胃腸激素’VIP有增加,且兩者的信號通路相似而作用方式可能相反,因此,VIP可能通過對自然殺傷細(xì)胞NKG2D活化性受體的影響進(jìn)而參與了胃癌免疫逃逸的調(diào)節(jié)。
　　 目的:
　　 探討VI

2、P對自然殺傷細(xì)胞NKG2D信號途徑的影響及其在胃癌免疫逃逸中的作用。
　　 方法：
　　 用VIP、VIP拮抗劑、NKG2D抗體及相關(guān)信號分子抑制劑(P13K、ERK及NF-κB抑制劑)作用NK細(xì)胞后,用免疫細(xì)胞化學(xué)及逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測NK細(xì)胞中VIP、VPAC1、NKG2D、DAP10、P13K、ERK及NF-KB蛋白及mRNA表達(dá)的變化；用MTT法觀察各種藥物作用后NK細(xì)胞對胃癌細(xì)胞株MKN45

3、生長增殖的影響,進(jìn)而分析上述藥物影響NK細(xì)胞NKG2D信號途徑后對NK細(xì)胞殺傷胃癌細(xì)胞毒的變化,最終判斷VIP對自然殺傷細(xì)胞NKG2D信號途徑的影響及其在胃癌免疫逃逸中的作用。
　　 結(jié)果：
　　 1、NK細(xì)胞具有細(xì)胞毒作用,VIP及各抑制劑對NK細(xì)胞的細(xì)胞毒作用有明顯的抑制作用,但VIP并不影響各抑制劑作用,且VIP對NK細(xì)胞的細(xì)胞毒作用可以被VIP拮抗劑而不被PAC1受體拮抗劑所逆轉(zhuǎn)。
　　 2、NK細(xì)胞不表

4、達(dá)VIP,VIP及其受體拮抗劑不影響NK細(xì)胞VPAC1表達(dá),而P13K、ERK、NF-κB抑制劑抑制其表達(dá)。
　　 3、VIP及各抑制劑均抑制NKG2D/DAP10/P13K/ERK/NF-κB信號通路的表達(dá),VIP對其表達(dá)的抑制作用可被VIP拮抗劑而不被PAC1受體拮抗劑所逆轉(zhuǎn)。
　　 結(jié)論：
　　 NK細(xì)胞對胃癌細(xì)胞株MKN45的細(xì)胞毒作用主要與NKG2D相關(guān),VIP通過抑制NKG2D信號通路從而抑制NK的細(xì)