牙周膿腫普雷沃菌分離鑒定及耐藥性研究.pdf

1、目的:
　　對于牙周炎伴牙周膿腫患者普雷沃菌屬的普遍性研究，比較API20a生化鑒定法和16S rRNA分子生物學(xué)方法鑒定普雷沃菌屬的準(zhǔn)確率，對分離鑒定的普雷沃菌進行抗生素敏感性分析及耐藥基因檢測，為臨床治療牙周厭氧菌感染合理選用抗生素提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　1.2011年8月-2012年8月，于復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院口腔科選取41例牙周膿腫患者（男21例，女20例，年齡:36±10歲）為研究對象。采用椅旁牙周膿

2、腫取樣，接種于厭氧基礎(chǔ)平板和篩選平板，應(yīng)用簡易厭氧袋培養(yǎng)法，經(jīng)兩至三次耐氧實驗，培養(yǎng)的牙周膿腫專性厭氧菌以API20a生化鑒定法和16S rRNA分子生物學(xué)技術(shù)進行鑒定，進一步篩選普雷沃菌屬。
　　2.根據(jù)美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(Clinical Laboratory StandardsInstitution)推薦的瓊脂稀釋法參考方案(M11-S220)測定牙周厭氧菌及普雷沃菌屬分別對甲硝唑、頭孢拉定、頭孢克肟、阿莫西林、克林霉

3、素、羅紅霉素、多西環(huán)素、亞胺培南，8種臨床常用抗菌藥物的敏感性。
　　3.根據(jù)藥敏實驗結(jié)果獲得耐藥菌株，采用PCR法，分別檢測耐藥菌株nim、cfxA、ermF、 tetQ耐藥基因，研究其普遍性。
　　結(jié)果:
　　1.簡易厭氧袋培養(yǎng)法分離培養(yǎng)的細菌具有良好的專性厭氧特性及傳代增殖能力。經(jīng)分離鑒定，牙周普雷沃菌屬的分離培養(yǎng)率為71.1％。以16S rRNA序列測定技術(shù)鑒定為標(biāo)準(zhǔn)，API20a生化技術(shù)鑒定牙周普雷沃菌屬準(zhǔn)確

4、率為83.3％，普雷沃菌種鑒定準(zhǔn)確率為38.1％。
　　2.藥敏試驗結(jié)果顯示:牙周膿腫普雷沃菌對亞胺培南的耐藥率為0％，對多西環(huán)素和甲硝唑耐藥率分別為4.8％和9.5％，對克林霉素、阿莫西林、羅紅霉素及頭孢克肟的耐藥率分別為38.1％、30.9％、26.2％和9.5％。
　　3.普雷沃耐藥菌株的耐藥基因檢測結(jié)果顯示:13株阿莫西林耐藥菌株中，cfxA檢出率為61.5％，19株克林霉素和/或羅紅霉素耐藥菌株中，ermF檢出率為

5、68.4％，4株甲硝唑耐藥普雷沃菌中，檢出2株nim基因陽性，均為nimB。4株多西環(huán)素耐藥菌株中，檢出2株tetQ陽性。
　　結(jié)論:
　　1.普雷沃菌屬是牙周膿腫厭氧菌群中的優(yōu)勢菌之一;API20a生化法鑒定普雷沃細菌種屬時存在一定誤差。
　　2.牙周膿腫來源的普雷沃菌對抗菌藥物的耐藥性不同，對口腔臨床常用藥物，克林霉素及羅紅霉素呈現(xiàn)的耐藥性較高;對青霉素類和甲硝唑的耐藥性的增長也需要引起注意。因此，在使用抗生素治療