腺相關(guān)病毒載體介導的反義VEGF基因轉(zhuǎn)染對骨肉瘤生長作用的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分含人反義VEGF基因腺相關(guān)病毒載體的包裝及滴度測定;目的:包裝高滴度的含人反義VEGF基因腺相關(guān)病毒載體.方法:將已克隆到表達質(zhì)粒pUF3-anti-hVEGF165基因,通過三種腺相關(guān)病毒前體質(zhì)粒(包裝質(zhì)粒-pXX2,腺病毒輔助質(zhì)?！猵XX6,表達質(zhì)粒pUF-anti-hVEGF165及pUF-LacZ)通過共轉(zhuǎn)染293細胞而同源重組,成功地復制了一種高滴度、無腺病毒污染的rAAV載體,并進行斑點雜交.結(jié)論:構(gòu)建高滴度的腺相關(guān)

2、病毒,為下一步實驗提供目的基因.第二部分rAAV—antiVEGF基因轉(zhuǎn)染對MG-63骨肉瘤細胞VEGF表達和細胞增殖的作用;目的:觀察以腺相關(guān)病毒(rAAV)為載體的血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)反義基因轉(zhuǎn)染對骨肉瘤細胞中VEGF表達和細胞增殖的影響.結(jié)論:rAAV—antiVEGF可封閉VEGF mRNA,使已轉(zhuǎn)染rAAV—antiVEGF的MG-63細胞表達的VEGF蛋白減少,抑制該細胞增殖.第三部分腺相關(guān)病毒介導的反義VEGF

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