蘋(píng)果腐爛病菌拮抗放線菌的篩選、鑒定及發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf_第1頁(yè)
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1、蘋(píng)果腐爛病是由Valsa mali Miyable et Yamada引起的一種真菌性病害。中國(guó)于1916年在遼寧南部發(fā)現(xiàn)該病,1948-1949年及1960年曾兩度在遼南地區(qū)大流行,造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。隨著化學(xué)農(nóng)藥引起的環(huán)境污染以及人們公認(rèn)的3R(抗性、殘毒、再猖獗)問(wèn)題的出現(xiàn),利用自然環(huán)境中的拮抗微生物防治植物病害愈來(lái)愈受到人們的重視。本文旨在從廣東省中山市采集的土樣中分離、篩選出對(duì)蘋(píng)果腐爛病菌有較強(qiáng)拮抗作用的放線菌,并對(duì)拮抗菌株

2、進(jìn)行初步鑒定及對(duì)其發(fā)酵條件進(jìn)行研究,以期為蘋(píng)果腐爛病的防治提供新的解決方案。主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下: 1.對(duì)從廣東省采集的土樣進(jìn)行熱處理及化學(xué)處理,以降低常規(guī)放線菌的出現(xiàn)幾率,然后通過(guò)稀釋平板法對(duì)原土樣及處理土樣同時(shí)進(jìn)行分離,共獲得放線菌293株。其中,未處理、熱處理及苯酚處理的土樣分離得到的菌株數(shù)量分別為214、22、57株,試驗(yàn)結(jié)果表明,經(jīng)過(guò)一定處理的土樣分離得到菌株的數(shù)量明顯減少,同時(shí)稀有放線菌的數(shù)量可能有所增加。

3、 2.以蘋(píng)果腐爛病菌為指示菌對(duì)分離菌株進(jìn)行篩選,平板對(duì)峙法初篩得到有抑制作用的菌株61株,其中抑菌率在50%以上的14株,占總數(shù)的4.78%;管碟法進(jìn)一步對(duì)拮抗效果明顯的菌株進(jìn)行復(fù)篩,試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,菌株Z-6的發(fā)酵濾液對(duì)蘋(píng)果腐爛病菌抑制作用最顯著,抑菌圈直徑達(dá)32.87mm。為了測(cè)定該菌株對(duì)蘋(píng)果腐爛病的防治效果,本文還進(jìn)行了蘋(píng)果離體枝條防治效果試驗(yàn),結(jié)果表明,該菌株的防治效果達(dá)32.9%。 3.采用插片培養(yǎng)的方法,以觀察菌株的培

4、養(yǎng)特征、形態(tài)特征尤其是孢子及孢子絲的形態(tài)特征為主,生理生化特性、抑菌譜測(cè)定為輔的傳統(tǒng)方法,初步鑒定菌株Z-6為鏈霉菌屬的金色類群。同時(shí),抑菌譜測(cè)定結(jié)果表明,菌株Z-6不僅對(duì)蘋(píng)果腐爛病菌抑制效果明顯,對(duì)其他16種供試病原真菌同樣有一定程度的抑制作用。尤其對(duì)小麥全蝕病菌、番茄灰霉病菌和稻瘟病菌效果明顯,抑制率均在70%以上。 4.經(jīng)平板對(duì)峙培養(yǎng)發(fā)現(xiàn),蘋(píng)果腐爛病菌生長(zhǎng)緩慢,周圍有紅褐色物質(zhì)產(chǎn)生,說(shuō)明菌株Z-6產(chǎn)生或分泌某種物質(zhì)從而抑制

5、病原菌的生長(zhǎng)。挑取病原菌菌苔邊緣菌絲鏡檢,發(fā)現(xiàn)菌絲表現(xiàn)為念珠狀、畸形、扭曲,頂端中空、膨脹,形成大量囊狀體。在發(fā)酵濾液對(duì)病原菌絲生長(zhǎng)的測(cè)定中,菌株Z-6發(fā)酵原液基本完全抑制病原菌菌絲的生長(zhǎng),其作用強(qiáng)度隨無(wú)菌濾液稀釋倍數(shù)的增加而減弱。稀釋1000倍液時(shí)基本無(wú)抑制作用。綜上所述,菌株Z-6對(duì)病原菌的作用機(jī)理是產(chǎn)生抗菌物質(zhì)直接破壞病原菌菌絲正常生長(zhǎng)。 5.為了提高菌株Z-6抑菌活性物質(zhì)的產(chǎn)量,增強(qiáng)其對(duì)蘋(píng)果腐爛病菌的拮抗效果,本文通過(guò)正

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