蘋果腐爛病菌拮抗放線菌的篩選、鑒定及發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf

1、蘋果腐爛病是由Valsa mali Miyable et Yamada引起的一種真菌性病害。中國于1916年在遼寧南部發(fā)現(xiàn)該病，1948-1949年及1960年曾兩度在遼南地區(qū)大流行，造成了嚴重的經(jīng)濟損失。隨著化學(xué)農(nóng)藥引起的環(huán)境污染以及人們公認的3R(抗性、殘毒、再猖獗)問題的出現(xiàn)，利用自然環(huán)境中的拮抗微生物防治植物病害愈來愈受到人們的重視。本文旨在從廣東省中山市采集的土樣中分離、篩選出對蘋果腐爛病菌有較強拮抗作用的放線菌，并對拮抗菌株

2、進行初步鑒定及對其發(fā)酵條件進行研究，以期為蘋果腐爛病的防治提供新的解決方案。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下: 1.對從廣東省采集的土樣進行熱處理及化學(xué)處理，以降低常規(guī)放線菌的出現(xiàn)幾率，然后通過稀釋平板法對原土樣及處理土樣同時進行分離，共獲得放線菌293株。其中，未處理、熱處理及苯酚處理的土樣分離得到的菌株數(shù)量分別為214、22、57株，試驗結(jié)果表明，經(jīng)過一定處理的土樣分離得到菌株的數(shù)量明顯減少，同時稀有放線菌的數(shù)量可能有所增加。

3、 2.以蘋果腐爛病菌為指示菌對分離菌株進行篩選，平板對峙法初篩得到有抑制作用的菌株61株，其中抑菌率在50％以上的14株，占總數(shù)的4.78％；管碟法進一步對拮抗效果明顯的菌株進行復(fù)篩，試驗數(shù)據(jù)表明，菌株Z-6的發(fā)酵濾液對蘋果腐爛病菌抑制作用最顯著，抑菌圈直徑達32.87mm。為了測定該菌株對蘋果腐爛病的防治效果，本文還進行了蘋果離體枝條防治效果試驗，結(jié)果表明，該菌株的防治效果達32.9％。 3.采用插片培養(yǎng)的方法，以觀察菌株的培

4、養(yǎng)特征、形態(tài)特征尤其是孢子及孢子絲的形態(tài)特征為主，生理生化特性、抑菌譜測定為輔的傳統(tǒng)方法，初步鑒定菌株Z-6為鏈霉菌屬的金色類群。同時，抑菌譜測定結(jié)果表明，菌株Z-6不僅對蘋果腐爛病菌抑制效果明顯，對其他16種供試病原真菌同樣有一定程度的抑制作用。尤其對小麥全蝕病菌、番茄灰霉病菌和稻瘟病菌效果明顯，抑制率均在70％以上。 4.經(jīng)平板對峙培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，蘋果腐爛病菌生長緩慢，周圍有紅褐色物質(zhì)產(chǎn)生，說明菌株Z-6產(chǎn)生或分泌某種物質(zhì)從而抑制

5、病原菌的生長。挑取病原菌菌苔邊緣菌絲鏡檢，發(fā)現(xiàn)菌絲表現(xiàn)為念珠狀、畸形、扭曲，頂端中空、膨脹，形成大量囊狀體。在發(fā)酵濾液對病原菌絲生長的測定中，菌株Z-6發(fā)酵原液基本完全抑制病原菌菌絲的生長，其作用強度隨無菌濾液稀釋倍數(shù)的增加而減弱。稀釋1000倍液時基本無抑制作用。綜上所述，菌株Z-6對病原菌的作用機理是產(chǎn)生抗菌物質(zhì)直接破壞病原菌菌絲正常生長。 5.為了提高菌株Z-6抑菌活性物質(zhì)的產(chǎn)量，增強其對蘋果腐爛病菌的拮抗效果，本文通過正