番茄葉霉病菌拮抗內(nèi)生放線菌的篩選及其活性物質(zhì)的初步研究.pdf

1、番茄葉霉病是番茄生產(chǎn)中普遍發(fā)生的病害，尤其在保護(hù)地內(nèi)危害更為嚴(yán)重，給番茄生產(chǎn)帶來了巨大的損失。植物內(nèi)生放線菌是一種豐富的微生物資源，能產(chǎn)生有生物活性的次級代謝產(chǎn)物，在植物病害防治中有重要意義。本論文針對番茄葉霉病在蔬菜生產(chǎn)中的危害，從多種植物內(nèi)生放線菌中篩選對番茄葉霉病有生防前景的拮抗菌株。 通過皿內(nèi)對峙試驗(yàn)，從175株內(nèi)生放線菌中篩選出對番茄葉霉病菌有拮抗作用的菌株26株，對番茄灰霉病菌有拮抗作用的菌株14株，對番茄早疫病菌有

2、拮抗作用的菌株26株。其中14株菌株對這三種病菌同時具有拮抗作用。菌株BARl-5是測試菌株中拮抗作用最強(qiáng)的一株內(nèi)生放線菌。 盆栽試驗(yàn)中，使用26株番茄葉霉菌拮抗內(nèi)生放線菌的發(fā)酵上清液和菌懸液對番茄葉霉病進(jìn)行防治，菌株BARl-5防治效果仍然最佳，達(dá)到49.7％，而接種前施藥和接種后施藥的生防效果分別達(dá)到62.6％和50.6％。 田間小區(qū)試驗(yàn)中，該菌株發(fā)酵液原液和稀釋5倍液的防效分別達(dá)到42.5％和33.1％，表現(xiàn)出較好

3、的防治效果。菌株BARl-5的確是一株很有生防潛力的內(nèi)生放線菌。 通過形態(tài)特征、培養(yǎng)特征、生理生化特征等方面的試驗(yàn)，結(jié)合1 6S rDNA序列分析，菌株BARl-5鑒定為假諾卡氏菌，在系統(tǒng)發(fā)育樹中與假諾卡氏菌亞目，假諾卡氏菌科，Goodfellowia屬親緣關(guān)系最近。 對菌株BARl-5的發(fā)酵培養(yǎng)基配方和發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化。單因子試驗(yàn)表明，菌株BARl-5分別以1％葡萄糖為碳源、O.2％酵母膏為氮源、0.05％MGSO<,

4、4>為無機(jī)鹽時，對番茄葉霉病菌的抑菌活性均最高。在此基礎(chǔ)上，用正交試驗(yàn)設(shè)計方法優(yōu)化培養(yǎng)基配方。優(yōu)化后的培養(yǎng)基成分為2％黃豆粉、0.5％玉米粉、0.5％葡萄糖、1％酵母膏、0.08％MgSO<,4>。發(fā)酵條件優(yōu)化結(jié)果為28℃，120r/min，培養(yǎng)基初始pH為7.2～7.5，搖瓶裝液量50mL/250mL，最佳發(fā)酵時間約為144h。 對菌株BARl.5產(chǎn)生的活性物質(zhì)理化性質(zhì)研究結(jié)果表明，該活性物質(zhì)對紫外線照射穩(wěn)定，在弱堿和中性pH