番茄葉霉菌拮抗放線菌的篩選、鑒定及發(fā)酵條件研究.pdf

1、本研究采用稀釋平板法從土壤中分離到11株放線菌。采用平板對峙法和生長速率法相結(jié)合對其進(jìn)行初步篩選和再次篩選，經(jīng)初步平板篩選后，有7株放線菌對番茄葉霉菌表現(xiàn)拮抗作用，其中有3株表現(xiàn)較強(qiáng)的抑菌活性。經(jīng)發(fā)酵液再次篩選發(fā)現(xiàn)在這3株菌株中來源于圖門土樣的BPS2菌株對番茄葉霉病菌的抑菌效果最好，抑菌圈直徑為15.5mm。BPS2菌株的發(fā)酵液除對番茄葉霉病菌具有很強(qiáng)的拮抗活性外，還對革蘭氏陽性菌金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaurea

2、us)、枯草桿菌(Bacillussubtilis)；革蘭氏陰性菌大腸桿菌(Escherichiacoli)；結(jié)核桿菌(Mycobecteriumtuberculosis)及多種植物病原真菌，如禾谷鐮刀病菌(Fusariumgraminearum)、玉米彎孢病菌(Curvularialunata)等都表現(xiàn)出不同程度的抑菌活性。 對BPS2菌株的形態(tài)和培養(yǎng)特征觀察、生理生化特性分析、細(xì)胞壁組分測定及16SrDNA序列分析。該菌基內(nèi)

3、菌絲無橫膈、不斷裂、氣生菌絲多分枝，孢子橢圓形，表面光滑；細(xì)胞壁化學(xué)組分Ⅰ型，糖型E型，表明該菌株屬于鏈霉菌屬，同時，在以16SrDNA序列為基礎(chǔ)構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹中，BPS2菌株與23株模式鏈霉菌(Streptomyces)聚成一支，其同源性為95.2％-97％，進(jìn)一步說明BPS2屬于鏈霉菌屬。其中BPS2菌株的16SrDNA序列與S.purpurascensDSM40310T的同源性最高，其同源性為97％，但該菌株與S.purpura

4、scensDSM40310T在形態(tài)特征、生理生化特性上均有較大差異。因此，初步鑒定菌株BPS2可能為鏈霉菌屬的一個新種，并將其命名為StreptomycestumenensisBPS2。 本文還對影響B(tài)PS2菌株抑菌活性的發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化，通過正交試驗設(shè)計，確定其培養(yǎng)基最佳配方為：蔗糖1.0％，玉米粉2.0％，蛋白胨0.3％，豆餅粉3.0％，硫酸銨0.5％，硫酸鎂0.1％，氯化鈉0.2％，磷酸二氫鉀0.02％，碳酸鈣0.3％，