幾種林木病原菌拮抗放線菌的篩選及其活性物質研究.pdf

1、本文對采自秦嶺火地塘林區(qū)的10個土樣進行了放線菌的分離，共得到了512株菌株，經(jīng)過初步分類合并，采用其中的292株進行了對幾種常見林木病原菌的拮抗試驗，結合發(fā)酵液的活性測定和生測治試驗得到了一株抑菌譜較廣、活性極強的放線菌--268號菌株，并對其做了一系列的研究。主要研究結果如下： 1.以高氏一號瓊脂、天門冬素淀粉瓊脂和精氨酸瓊脂培養(yǎng)基做為分離培養(yǎng)基，重鉻酸鉀濃度為150 mg/L，可以較好的分離該土樣中的放線菌。 2.

2、各土樣的各層鏈霉菌屬均為絕對優(yōu)勢屬，其它屬分離出的較少，粉紅孢類群、金色類群和灰褐類群是大多土樣的優(yōu)勢類群。 3.平板初篩結果表明：14、42、45、50、162、189、268及289號菌對多種靶菌均具有較強的拮抗作用。發(fā)酵液的活性測定表明：42、189和268號菌株對多種靶菌存在較強的抑制性。預防效果的生物測定結果表明：268號菌株的效果最好，預防效果為64.7％。 4.對268號菌株的發(fā)酵液進行了萃取試驗，其乙酸乙

3、酯相具有強烈的抑菌活性。乙酸乙酯相的薄層層析試驗表明：以體積比10：7的石油醚和丙酮為展開劑可以較好地將活性組分與其他組分分離開。并對268號菌株活性產(chǎn)物的性質進行了初步研究，結果表明：該物質沒有揮發(fā)性，對酸有著較好的穩(wěn)定性，對強堿不穩(wěn)定，對熱和紫外線較為穩(wěn)定。 5.通過單因素試驗結合正交試驗，對268號菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件進行了優(yōu)化，結果表明：最適的發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：黃豆餅粉10 g/L，蛋白胨3 g/L，葡萄糖10g/

4、L，NaCl 2.5 g/L，F(xiàn)eS04 0.01g/L，pH≈8.0，最適的發(fā)酵條件為：菌齡48 h，接種量2％，裝液量200 ml，發(fā)酵時間6 d，搖床轉速150 dr/min。 6.對268號菌株活性產(chǎn)物的抑菌機制進行了初步研究，結果表明：其抑菌活性主要體現(xiàn)在對菌絲的影響上，對楊樹潰瘍病、蘋果腐爛病和楊樹腐爛病病原菌的生長抑制作用最強，EC50分別為0.0076 ml/ml、0.0061 ml/ml和0.0043 ml/m