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文檔簡介
1、目的
研究杜仲葉提取物對大鼠成骨細胞的增殖作用及其分子作用機制。
方法
選取新生SD大鼠的乳鼠顱蓋骨通過消化法分離出乳鼠成骨細胞,并用堿性磷酸酶染色進行細胞鑒定;用杜仲葉提取物分別以0 mg/ml,5mg/ml,20mg/ml,40mg/ml,60mg/ml五種不同濃度梯度對大鼠成骨細胞干預,2d后用MTT方法檢測細胞增殖情況;用無血清無酚紅的培養(yǎng)基饑餓大鼠成骨細胞2h后,分別以0 mg/ml,5mg/ml
2、,20mg/ml,40mg/ml,60mg/ml五種不同濃度杜仲葉提取物干預大鼠成骨細胞,2h后Western blot檢測ERK和AKT的活化情況。
結(jié)果
細胞形態(tài)學觀察符合大鼠成骨細胞的生長特征;堿性磷酸酶染色后的成骨細胞呈藍紫色(特異性染色);MTT法結(jié)果顯示杜仲葉提取物促進大鼠成骨細胞的增殖,并具有濃度依賴性;Western blot結(jié)果顯示杜仲葉提取物可使ERK及AKT磷酸化水平提高,并具有濃度依賴性。
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