非小細(xì)胞肺癌的EGFR基因突變與擴(kuò)增狀況及信號(hào)傳導(dǎo)蛋白AKT、ERK、STAT磷酸化表達(dá).pdf

1、 分類(lèi)號(hào)： 分類(lèi)號(hào)：R655.3 學(xué)校代碼： 學(xué)校代碼：10392 學(xué)科專(zhuān)業(yè)代碼： 學(xué)科專(zhuān)業(yè)代碼：100210 學(xué) 號(hào)： 號(hào)：200802057 福 建 醫(yī) 科 大 學(xué) 博 士 研 究 生 畢 業(yè) 論 文 非小細(xì)胞肺癌的 非小細(xì)胞肺癌的 EGFR EGFR 基因突變與擴(kuò)

2、增狀況及 基因突變與擴(kuò)增狀況及 信號(hào)傳導(dǎo)蛋白 信號(hào)傳導(dǎo)蛋白 AKT AKT、ERK ERK、STAT STAT 磷酸化表達(dá) 磷酸化表達(dá) The situations of EGFR mutation and amplification and the phosphorylation expressions of signaling protein AKT, ERK, STAT in Non-small cell lung cancer

3、學(xué) 位 類(lèi) 型 ： 型 ： 醫(yī)學(xué)博士 醫(yī)學(xué)博士 所 在 學(xué) 院 ： 院 ： ?？?福總臨床 臨床醫(yī)學(xué)院 學(xué)院 研 究 生： 生： 賴繁彩 賴繁彩 學(xué) 科 學(xué) 科 、 專(zhuān) 業(yè) ： 專(zhuān) 業(yè) ： 外科學(xué)（胸心外） 外科學(xué)（胸心外） 導(dǎo) 師： 師： 陳龍 陳龍 教授 教授 研究起 研究起止日期： 止日期： 2010 2010 年 06 06 月至 月至 2012 2012 年

4、 03 03 月 答 辯 日 期 ： 答 辯 日 期 ： 2012 2012 年 06 06 月 01 01 日 二○一二 ○一二年六月 目錄 目錄 中文摘要 中文摘要 ................................ ................................................... ................... 錯(cuò)誤 錯(cuò)誤!未定義書(shū)簽。 未定義書(shū)簽。 英文摘要 英文

5、摘要 .................................................................... 3 縮略詞簡(jiǎn)表 縮略詞簡(jiǎn)表 .................................................................. 5 第一章 第一章 前 言 .................................................

6、............. 6 第二章 第二章 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 ............................................................ 9 1 標(biāo)本來(lái)源與處理 ......................................................... 9 1.1 標(biāo)本來(lái)源 ......................................

7、................... 9 1.2 標(biāo)本處理 ......................................................... 9 2 EGFR 基因 19、21 外顯子突變檢測(cè) ......................................... 9 2.1 主要試劑與儀器 ...........................................

8、........ 9 2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑及儀器 ......................................... 9 2.1.2 常用溶劑的配置 ............................................ 10 2.2 石蠟組織 DNA 抽提 ................................................ 10 2.3 聚合酶鏈反應(yīng)(P

9、CR)進(jìn)行 EGFR 基因擴(kuò)增 .............................. 11 2.3.1 PCR 引物設(shè)計(jì) .............................................. 11 2.3.2 PCR 擴(kuò)增 .................................................. 12 2.3.3 PCR 產(chǎn)物電泳 ................

10、.............................. 13 2.3.4 PCR 產(chǎn)物純化 .............................................. 13 2.3.5 PCR 產(chǎn)物片段測(cè)序反應(yīng) ...................................... 13 2.3.6 ABI 測(cè)序儀測(cè)序及判讀 ...................................

11、... 14 3 EGRR 基因擴(kuò)增檢測(cè) ..................................................... 14 3.1 FISH 檢測(cè)的原理 ................................................. 14 3.2 主要試劑及儀器 .................................................. 14 3

12、.2.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑及儀器 ........................................ 14 3.2.2 FISH 檢測(cè)常用試劑配置方法 ................................. 15 3.3 實(shí)驗(yàn)方法與步驟 .................................................. 16 3.3.1 石蠟切片預(yù)處理 ................

13、............................ 16 3.3.2 雜交儀變性雜交 ............................................ 16 3.3.3 石蠟切片洗滌與觀察 ........................................ 16 3.3.4 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) ..............................................

14、 17 4 EliVisionTM plus 兩步法免疫組織化學(xué)染色檢測(cè) p-Akt、p-ERK1/2 和 p-STAT3 的表達(dá)....................................................................... 18 4.1 免疫組織化學(xué)技術(shù)（immunohistochemistry,IHC）的原理 .............. 18 4.2 主要試劑及儀器 ..

15、................................................ 18 4.2.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑及儀器 ........................................ 18 4.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑的配置 ........................................ 19 4.3 實(shí)驗(yàn)方法與步驟 ..............................

16、.................... 19 4.4 結(jié)果判斷 ........................................................ 21 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 ............................................................ 21 第三章 第三章 結(jié) 果 ....................................