E-cadherin通過激活MEK-ERK信號通路促進卵巢癌細胞SKOV-3增殖.pdf

1、研究背景：
　　 鈣粘素(Cadherin)是細胞黏附分子中的一個家族，它們是親同性的細胞黏附分子，其作用依賴于Ca2+的存在。目前鑒定出的Cadherin有30多種，分布于不同的組織中，常見的有上皮鈣粘素（E-cadherin）、神經(jīng)鈣粘素（N-cadherin）、胚胎鈣粘素(P-cadherin)等。E-cadherin是鈣粘素家族中的重要一員，是分子量為120KD的跨膜蛋白，由位于16號染色體長臂22.1區(qū)的CDH1基因編

2、碼。E-cadherin不僅可以通過胞外區(qū)域幫助建立鈣依賴性的同型細胞間的黏附，還可以通過胞內短尾與連接素結合連接到細胞骨架肌動蛋白絲建立細胞內外的聯(lián)系，進而在細胞內外發(fā)揮重要作用。
　　 由于E-cadherin可以加強細胞間的黏附、抑制上皮細胞向間質細胞轉化(epithelial-mesenchymal-transition，EMT)進而抑制腫瘤細胞的侵襲及轉移，所以它在肺癌、胃癌、喉癌、胰腺癌和膀胱癌等多種惡性腫瘤中通常被

3、認為是一個腫瘤抑制基因。然而，近年來越來越多的研究結果開始挑戰(zhàn)這一觀點。例如有人報道E-cadherin是細胞不貼壁生長所必需的，并且抑制口腔鱗癌細胞的凋亡。E-cadherin-連接素細胞黏附復合體表達被發(fā)現(xiàn)在頭頸部鱗狀細胞癌及其淋巴結轉移中起到重要作用。值得一提的是，E-cadherin在卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展中可能發(fā)揮特異性作用的現(xiàn)象日益受到學者們的重視。現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)，正常的人類卵巢上皮細胞不表達E-cadherin，而卵巢裂隙、包涵膿腫

4、及內陷處的上皮細胞卻高表達E-cadherin，而90％的卵巢上皮癌發(fā)生在這些部位。在轉移性卵巢癌的各個時期都發(fā)現(xiàn)E-cadherin的表達，并且表達水平明顯高于正常卵巢組織。這些結果提示E-cadherin的表達水平在卵巢上皮癌的早期發(fā)生階段上調并可能發(fā)生促進細胞癌變的作用，這與E-cadherin的傳統(tǒng)腫瘤抑制基因的角色大相徑庭。然而，E-cadherin在晚期卵巢癌的發(fā)展中發(fā)揮何種作用，其機制如何均不明確，有待于展開研究來探索。<

5、br>　　 研究目的：
　　 盡管E-cadherin因其可以抑制腫瘤轉移而被認為是一個經(jīng)典的抑癌基因，其在卵巢癌中卻呈獨特的高表達狀態(tài)。本研究探討E-cadherin促進卵巢癌細胞增殖的可能作用及其機制。
　　 研究方法：
　　 在表達E-cadherin的卵巢癌細胞系SKOV-3中利用RNA干擾（RNAi）技術阻斷E-cadherin的編碼基因CDH1，然后通過CCK-8和克隆形成實驗來觀察SKOV-3細胞

6、生物學行為的相應變化。然后，應用已建立的研究E-cadherin介導的鈣依賴性細胞黏附的細胞模型，通過Westernblot研究E-cadherin在卵巢癌中的可能作用及相關信號轉導通路。
　　 研究結果：
　　 1.轉染針對CDH1的siRNA質粒后，卵巢癌細胞株SKOV-3E-cadherin的表達明顯下調。
　　 2.阻斷E-cadherin的表達后SKOV-3細胞株的生長和增殖明顯被抑制。