hsBAFF通過PTEN-AkT-Erk1-2信號轉(zhuǎn)導(dǎo)促進B細胞增殖分子機理研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩66頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、本研究運用細胞培養(yǎng)、MTS分析、RNA干擾、Western bloting等細胞學(xué)分子生物學(xué)技術(shù)和方法,以Raji細胞為實驗對象,研究了PTEN活性與Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)在hsBAFF誘導(dǎo)B細胞增殖和存活中作用;通過上調(diào)PTEN表達、或抑制/鈍化Akt活性,進一步探討了hsBAFF促B細胞增殖和存活過程中,PTEN/Akt功能活性與Erk1/2通路激活的關(guān)系。本研究旨在為理解BAFF調(diào)控B淋巴瘤與自身免疫性疾病發(fā)生提供理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。結(jié)果

2、如下:
  1. hsBAFF促進B細胞增殖和存活關(guān)聯(lián)PTEN抑制和Akt激活
  Raji細胞用0-0.25μg/ml hsBAFF處理12h或48 h、或用0.25μg/ml hsBAFF處理0-24h、或在用Akt抑制劑Ⅹ(10μM)預(yù)處理1h后加hsBAFF(0.1和0.25μg/ml)處理12 h或48h;在一些情況下,分別用Ad-PTEN和Ad-GFP感染的Raji細胞用hsBAFF(0.1和0.25μg/ml)

3、處理12h或48h。然后,通過細胞計數(shù)和MTS分析評估細胞增殖和存活表現(xiàn)、Western blotting檢測PTEN、Akt及其相關(guān)信號分子表達。結(jié)果顯示:hsBAFF以濃度和時間依賴方式促進Raji細胞增殖和存活、增加Survivin以及PTEN、Akt、S6K1、4E-BP1、GSK3β磷酸化表達;抑制Akt活性阻滯hsBAFF誘導(dǎo)Bcl-2和Survivin增加以及S6K1、GSK3β磷酸化增加,進而削弱細胞增殖和存活;PTEN

4、過表達部分地抑制hsBAFF誘導(dǎo)Bcl-2、Survivin升高以及PTEN、Akt、S6K1、4E-BP1、GSK3β磷酸化增加,并因此降低細胞增殖和存活。提示:hsBAFF抑制PTEN和激活A(yù)kt活性促進B細胞增殖和存活。
  2. hsBAFF通過激活A(yù)kt-Erk1/2信號通路促進B細胞增殖和存活
  Raji細胞或Ad-dn-Akt、Ad-MKK1-K97M的感染Raji細胞用Akt抑制劑Ⅹ(10μM)和/或Erk

5、1/2抑制劑PD98059(10μM)預(yù)處理1h后加hsBAFF(0.1和/或0.25μg/ml)處理12h或48 h。然后,通過細胞計數(shù)和MTS分析評估細胞增殖和存活表現(xiàn)、Western blotting檢測相關(guān)信號分子表達。結(jié)果顯示:hsBAFF可以通過Akt通路調(diào)控Erk1/2活性促進Raji細胞增殖和存活。這被抑制Akt活性削弱hsBAFF誘導(dǎo)的Erk1/2磷酸化和Raji細胞增殖和存活,以及鈍化Akt部分地阻止hsBAFF誘導(dǎo)

6、Erk1/2磷酸化和Raji細胞增殖和存活,以及鈍化MKK1抑制Raji細胞增殖和存活證據(jù)支持。提示:hsBAFF通過激活A(yù)kt-Erk1/2信號通路促進B細胞增殖和存活。
  3. hsBAFF通過抑制PTEN激活Erk1/2通路促進B細胞增殖和存活
  Ad-PTEN和Ad-GFP感染的Raji細胞用hsBAFF(0.1和0.25μg/ml)處理12h、或用Erk1/2抑制劑PD98059(10μM)預(yù)處理1h后加hsB

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論