OK-432腫瘤細(xì)胞疫苗抗腫瘤效應(yīng)的研究.pdf

1、目的
　　研制新型OK-432腫瘤細(xì)胞疫苗，并觀察其對DBA/2小鼠舌癌的抗腫瘤效應(yīng)，為口腔癌的臨床治療提供新方法。
　　方法
　　1.以glutaraldehyde（GA）為交聯(lián)劑，使KLN-205細(xì)胞與OK-432產(chǎn)生交聯(lián)，剔除剩余物制成OK-432疫苗；
　　2.采用相位差顯微鏡和電子顯微鏡觀察確認(rèn)OK-432疫苗的表面形態(tài)及其變化；
　　3.采用相位差顯微鏡觀察臺盼藍(lán)染色后OK-432腫瘤疫苗中KL

2、N-205細(xì)胞的存活情況；
　　4.將DBA/2小鼠隨機(jī)分為四組，每組20只，分別右側(cè)腹腔皮下注射生理鹽水、OK-432、滅活的KLN-205細(xì)胞、OK-432疫苗，接種KLN-205腫瘤細(xì)胞后觀察對比舌癌發(fā)生率及瘤體大小，并用統(tǒng)計學(xué)分析其結(jié)果。
　　5.免疫組織化學(xué)染色觀察舌組織中CD4及CD8的分布。
　　結(jié)果
　　1.OK-432腫瘤疫苗位相差顯微鏡觀察可見:OK-432疫苗組，OK-432呈放射狀吸附于腫

3、瘤細(xì)胞周圍；OK-432腫瘤疫苗臺盼藍(lán)染色鏡下未見活細(xì)胞；
　　2.OK-432腫瘤疫苗的電子顯微鏡可見：OK-432疫苗組，OK-432吸附于細(xì)胞膜表面，導(dǎo)致細(xì)胞膜隆起變性，細(xì)胞膜與OK-432菌膜間可見微通道；
　　3.OK-432疫苗組腫瘤發(fā)生率與其他三組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001），且發(fā)生率均小于其它三組。KLN-205組與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；
　　4.腫瘤大小除KLN-2

4、05組與對照組間差別沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.094）外，其余各組間差別均有統(tǒng)計學(xué)意義，其中OK-432疫苗組腫瘤體積均小于其他三組。
　　5.免疫組織化學(xué)結(jié)果：OK-432疫苗組腫瘤接種24hrs后，KLN-205腫瘤細(xì)胞周圍有大量的淋巴細(xì)胞（CD4、CD8）浸潤。
　　結(jié)論
　　1.這種以戊二醛（GA）為交聯(lián)劑，將佐劑OK-432交聯(lián)于KLN-205細(xì)胞膜表面，同時滅活腫瘤細(xì)胞而制備腫瘤疫苗的方法具有一定的可行性；<