2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  研究臨床患者骨肉瘤組織和骨肉瘤旁正常骨組織中組蛋白去乙?;?(histone deacetylase5,HDAC5)的表達情況;檢測實驗室常用骨肉瘤細胞系U20S,Saos-2和MG63中HDAC5的表達情況;研究HDAC5的表達量對于骨肉瘤細胞分裂增殖能力的影響;研究表觀遺傳學調控基因HDAC5與癌基因twistl的關系及其在骨肉瘤細胞分裂增殖過程中的作用;推測HDAC5在骨肉瘤細胞增殖過程中的表觀遺傳學調控作用,

2、并探討將其作為靶點進行癌癥治療的前景。
  方法:
  從臨床手術中取得患者骨肉瘤組織標本和病灶周圍的正常組織樣本。使用逆轉錄定量聚合酶鏈式反應(RT-qPCR)、蛋白免疫印記法(Western blotting)等方法,比較骨肉瘤組織和正常組織中HDAC5基因的表達量差異,同時也將三株骨肉瘤細胞系U20S,Saos-2和MG63與人成骨細胞株hFOB1.19進行比較。為研究HDAC5在骨肉瘤細胞分裂、增殖過程中的作用,將H

3、DAC5基因在U20S細胞系中進行過表達和基因沉默,并對其分別進行細胞計數(shù)。為進一步研究HDAC5在骨肉瘤細胞分裂、增殖過程中的細胞內(nèi)信號轉導和表觀遺傳學調控情況,在HDAC5基因過表達和沉默的情況下分別定量癌基因twistl的表達量,并比較U20S骨肉瘤細胞系twist1基因沉默時,細胞增殖能力的變化情況。
  結果:
  1.臨床骨肉瘤組織樣本中HDAC5的表達量明顯高于癌旁正常組織(P<0.001),骨肉瘤細胞系U20

4、S,Saos-2和MG63中HDAC5的轉錄與表達量也明顯高于正常組織(P<0.05)。
  2.在導入HADC5基因并過表達后,U20S細胞系的增殖分裂能力明顯提高(P<0.01);而利用RNAi技術將U20S細胞系中HDAC5基因沉默之后,細胞的增值分裂能力則明顯下降(P<0.01)。
  3.在過表達HDAC5的細胞系中,twist1蛋白的表達量明顯高于對照組(P<0.001);而利用RNAi技術抑制HDAC5的表達后

5、,twist1蛋白的表達量也相應地降低。(P<0.001)
  4.利用RNAi技術對U20S細胞系中twist1基因沉默后,其分裂增殖能力與正常U20S骨肉瘤細胞系相比有顯著的下降(P<0.01)。在HDAC5過表達的U20S細胞系中,同時沉默twist1基因,其分裂增值能力又回復到正常U20S細胞系的水平。
  結論:
  1.HDAC5在骨肉瘤細胞中調控細胞增殖、分裂。其過表達可以顯著地提高骨肉瘤細胞的分裂增殖能

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