七氟烷預(yù)處理對(duì)大鼠心肌的延遲性保護(hù)作用——NF-κB介導(dǎo)的自噬機(jī)制探討.pdf

1、目的:探討核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)介導(dǎo)的自噬在七氟烷預(yù)處理對(duì)在體大鼠心肌缺血再灌注損傷產(chǎn)生延遲性保護(hù)作用的機(jī)制。
　　 方法:選用在體大鼠建立心肌缺血再灌注損傷模型,通過(guò)測(cè)定心肌梗死范圍評(píng)價(jià)七氟烷預(yù)處理的作用效果；應(yīng)用光鏡觀察心肌組織形態(tài)學(xué)變化,透射電鏡觀察心肌細(xì)胞中自噬和溶酶體的激活以及細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化；采用凝膠電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA)和Western blot法檢測(cè)七氟烷預(yù)處理對(duì)NF-κB和自噬相關(guān)蛋白表達(dá)的影響,

2、以及應(yīng)用NF-κB抑制劑小白菊內(nèi)酯(PTN)后對(duì)TNF-α、IL-1β和自噬的影響。
　　 結(jié)果:七氟烷預(yù)處理組比單純?nèi)毖M減少了大鼠心肌梗死范圍,形態(tài)損傷也減輕；透射電鏡結(jié)果顯示七氟烷預(yù)處理組明顯誘導(dǎo)缺血前心肌細(xì)胞自噬產(chǎn)生。與空白對(duì)照組比較,七氟烷預(yù)處理組缺血前的NF-κB-DNA結(jié)合活性上調(diào),TNF-α、IL-1β、LC3-Ⅱ和Cathepsin B表達(dá)亦上調(diào)；與空白對(duì)照組比較,單純?nèi)毖M和七氟烷預(yù)處理組再灌注后NF-κB-

3、DNA結(jié)合活性、TNF-α、IL-1β、LC3-Ⅱ和Cathepsin B表達(dá)均上調(diào),但七氟烷預(yù)處理組的NF-κB-DNA結(jié)合活性、TNF-α、IL-1β、LC3-Ⅱ比單純?nèi)毖M表達(dá)上調(diào)幅度減小,而在七氟烷預(yù)處理前應(yīng)用PTN,使再灌注后NF-κB和LC3-Ⅱ表達(dá)較七氟烷預(yù)處理組增加。
　　 結(jié)論:七氟烷預(yù)處理發(fā)揮延遲性心肌保護(hù)作用的機(jī)制可能是預(yù)先激活NF-κB,隨后介導(dǎo)了TNF-α、IL-1β和自噬的適量激活,抑制了再灌注后NF