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文檔簡介
1、目的:建立一種簡單、快速檢測博爾納病病毒(BDV)的雙抗體夾心ELISA法,并探索其應用于臨床的可行性。
方法:首先根據(jù)雙抗體夾心ELISA法,分別對BDV p24小鼠單克隆抗體、BDV p24兔多克隆抗體和酶標抗體作多梯度稀釋,以確定最佳實驗條件,然后對該方法的精密度、靈敏度、穩(wěn)定性與特異性進行初步評價。并采用已建立的雙抗體夾心ELISA法檢測44例臨床確診為病毒性腦炎(VE)的患者腦脊液(CSF),以及44例神經(jīng)系統(tǒng)非
2、炎性疾病患者腦脊液樣本中是否存在BDV抗原。采用統(tǒng)計學軟件對得到的實驗結(jié)果進行統(tǒng)計學意義分析。
結(jié)果:BDV p24小鼠單克隆抗體的最佳稀釋度為1∶160,BDV p24兔多克隆抗體的最佳稀釋度為1∶2500,酶標抗體的最佳稀釋度為1∶5000,該法的檢測靈敏度為170ng/ml,精密度批內(nèi)變異<10%,批間變異<15%,同時具有良好的穩(wěn)定性與特異性。另外用該法檢測臨床標本其中病毒性腦炎患者腦脊液中有3例檢出BDV抗原陽性
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