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文檔簡介
1、目的:通過研究miR-429對人膀胱癌BIU-87細胞增殖侵襲的影響,探討miR-429在人膀胱癌細胞中的作用機制。
方法:通過基因芯片篩選出人膀胱癌組織較癌旁正常組織的差異表達的miRNA,實時定量PCR驗證相關(guān)miRNA的差異表達;并構(gòu)建miR-429反義核苷酸序列(AS-miR-429)下調(diào)miR-429的表達,瞬時轉(zhuǎn)染人膀胱癌BIU-87細胞。然后,實時定量PCR檢測miR-429表達水平的變化。最后,運用MTT實驗、
2、流式細胞儀檢測細胞的增殖與凋亡;并通過Trans-well實驗,檢測細胞的侵襲力。
結(jié)果:基因芯片篩選發(fā)現(xiàn)miR-429、miR-143、miR-106a等在膀胱癌組織中差異表達,其中miR-429在膀胱癌組織中顯著上調(diào);實時定量PCR驗證發(fā)現(xiàn)miR-429在膀胱癌組織中亦顯著上調(diào)。成功構(gòu)建miR-429反義核苷酸序列,并成功瞬時轉(zhuǎn)染人膀胱癌BIU-87細胞。實時定量PCR檢測轉(zhuǎn)染結(jié)果顯示,miR-429表達在膀胱癌細胞中降低
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