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文檔簡介
1、目的:通過蓮心堿(Liensinine)作用于膀胱癌細(xì)胞T24,研究蓮心堿對(duì)膀胱癌細(xì)胞T24增殖及細(xì)胞周期的影響。同時(shí)初步探討蓮心堿調(diào)控膀胱癌細(xì)胞周期的機(jī)制,從而為用蓮心堿作為膀胱灌注輔助化療藥物的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
方法:使用不同濃度的蓮心堿(1.5625、3.125、6.25、12.5、25μg/mL)處理膀胱癌細(xì)胞T24,通過CCK-8實(shí)驗(yàn)及克隆形成實(shí)驗(yàn),檢測(cè)蓮心堿對(duì)細(xì)胞增殖的影響;對(duì)細(xì)胞進(jìn)行PI染色后,然后使用流式
2、細(xì)胞儀,檢測(cè)蓮心堿對(duì)T24細(xì)胞周期的影響;通過實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)及Western Blot技術(shù)檢測(cè)蓮心堿作用后T24細(xì)胞的p21基因的表達(dá)。
結(jié)果:蓮心堿對(duì)膀胱癌細(xì)胞T24增殖有明顯的抑制作用:T24細(xì)胞抑制率分別為(-0.5±24.5)%、(26.51±14.28)%、(43.26±5)%、(42.93±8.51)%、(55.11±3.01)%。1.5625μg/mL蓮心堿組與同濃度甲醇對(duì)照組無明顯差異,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0
3、.05),3.125、6.25、12.5、25μg/mL蓮心堿組相對(duì)于甲醇對(duì)照組表現(xiàn)出明顯差異,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);細(xì)胞周期檢測(cè)結(jié)果顯示,經(jīng)蓮心堿干預(yù)后,膀胱癌細(xì)胞T24的S期細(xì)胞群明顯增加,占有比例為(23.11±0.57)%、(24.91±1.10)%、(32.10±5.18)%、(53.09±3.91)%、(55.97±0.45)%,蓮心堿將T24細(xì)胞阻滯在S期;實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,蓮心堿提高上調(diào)了T24細(xì)胞
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