卵巢上皮性癌血漿游離DNA的檢測及臨床價值.pdf

1、目的:通過對健康對照、卵巢良性腫瘤及卵巢上皮性癌患者血漿中游離DNA水平的檢測,以期建立一種能夠?qū)υ缙诼殉舶┻M(jìn)行快捷、敏感、特異的篩查診斷方法;通過觀察卵巢上皮性癌循環(huán)DNA不同時期的動態(tài)變化,進(jìn)一步了解血漿游離DNA在療效觀察、復(fù)發(fā)預(yù)測及預(yù)后隨訪中的作用;同時還進(jìn)行血漿游離DNA水平與血清CA125水平的相關(guān)性研究,以期找出血漿游離DNA的變化規(guī)律及與血清CA125的相關(guān)性,進(jìn)一步完善卵巢癌的診斷及隨訪指標(biāo).方法:收集復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤

2、醫(yī)院卵巢上皮性癌標(biāo)本207份,其中術(shù)前血標(biāo)本93份,術(shù)后血標(biāo)本114份,有完整隨訪資料標(biāo)本12份.另外收集卵巢良性腫瘤標(biāo)本25份,取自腫瘤研究所健康體檢人群標(biāo)本30份.所收集標(biāo)本離心去血球后-80C°凍存;采用DNA抽提試劑盒進(jìn)行劑量DNA抽提和純化;利用標(biāo)準(zhǔn)含量DNA制訂檢測DNA的標(biāo)準(zhǔn)曲線;應(yīng)用SYBR green I作為熒光顯色劑,在紫外與可見光成像分析系統(tǒng)內(nèi),345nm波長紫外光下激活,以CCD相機(jī)攝像后輸入電腦系統(tǒng),分別讀取各

3、不同含量DNA所顯色的發(fā)光強(qiáng)度,再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線所作回歸方程,分別計算出其相應(yīng)的DNA含量.采用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析.結(jié)論:卵巢癌血漿游離DNA的檢測,跨越了檢測腫瘤切除標(biāo)本的局限性,有望成為一種方便、快捷、特異、無創(chuàng)或微創(chuàng)性的檢測手段.即使在Ⅰ期患者中,血漿DNA水平也顯著升高,因此有望成為卵巢癌早期診斷的一個理想指標(biāo).并可在卵巢癌的療效觀察、復(fù)發(fā)預(yù)測及預(yù)后隨訪等方面發(fā)揮作用;術(shù)后血漿DNA持續(xù)維持較高水平,可能提示預(yù)