壓力性肺水腫負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制的研究.pdf

1、心力衰竭已經(jīng)日益成為最常見(jiàn)、對(duì)患者危害最大的心血管病之一，而心源性肺水腫是心衰嚴(yán)重的并發(fā)癥，并且目前還沒(méi)有針對(duì)性的治療措施。通常認(rèn)為心源性腫水腫的原因是Starling力失去平衡，最近有研究發(fā)現(xiàn)肺血管壓力變化能引起血管內(nèi)皮細(xì)胞的改變，調(diào)節(jié)血管的通透性，并且可以影響肺水腫的形成。為此我們深入研究了內(nèi)皮細(xì)胞在壓力性肺水腫形成過(guò)程中的作用。 我們利用實(shí)時(shí)顯微鏡顯影技術(shù)，觀察內(nèi)皮細(xì)胞鈣離子(Ca2+)濃度變化和內(nèi)皮生成的一氧化氮(NO)

2、的變化；通過(guò)測(cè)量離體灌注肺的重量變化計(jì)算肺的濾過(guò)系數(shù)(Kf)，證明了在肺血管靜水壓上升的情況下，內(nèi)皮細(xì)胞參與的一系列病理生理反應(yīng)構(gòu)成一個(gè)負(fù)反饋回路，能夠保護(hù)微血管屏障。利用免疫組化和Westernboltting方法我們證實(shí)了瞬時(shí)受體電位香草素4(TRPV4)通道和磷酸二酯酶5(PDE5)在肺內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)。利用TRPV4通道激動(dòng)劑和抑制劑，我們發(fā)現(xiàn)肺毛細(xì)血管的靜水壓的上升會(huì)激活TRPV4通道，引起Ca2+內(nèi)流，而Ca2+濃度上升又激活

3、了肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)，引起平滑肌收縮，導(dǎo)致Kf增加，同時(shí)NO合成也增加。在TRPV4基因缺失小鼠，我們發(fā)現(xiàn)由于肺毛細(xì)血管靜水壓增高引起的Ca2+內(nèi)流；NO合成增加和肺濕/干比例增大等明顯減弱，進(jìn)一步印證了TRPV4在壓力性肺水腫中的作用。內(nèi)皮合成的NO能夠促進(jìn)環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)形成，cGMP作為重要的第二信使之一，能夠抑制靜水壓升高引起的Ca2+內(nèi)流，繼而抑制血管滲透性的增加。通過(guò)原位顯影技術(shù)觀察內(nèi)皮細(xì)胞Ca2+濃度，我們

4、證明了cGMP可以使TRPV4通道失活。這樣，肺毛細(xì)血管靜水壓升高引起Ca2+經(jīng)由TRPV4通道流入內(nèi)皮細(xì)胞，導(dǎo)致血管滲透性增加；但是與此同時(shí)，Ca2+內(nèi)流也激活了NO參與的負(fù)反饋回路，這個(gè)負(fù)反饋反應(yīng)是由cGMP介導(dǎo)的，能夠減輕Ca2+對(duì)內(nèi)皮的傷害，起到保護(hù)血管屏障的作用。另外，在急性心肌梗塞大鼠活體模型中，我們應(yīng)用了PDE5抑制劑—西地那非，它能夠抑制cGMP降解。結(jié)果證實(shí)西地那非能夠減輕壓力性肺水腫的嚴(yán)重程度。這一新的調(diào)節(jié)通路的發(fā)現(xiàn)