姜黃素的醇提工藝及其對(duì)動(dòng)物的肝保護(hù)研究.pdf

1、姜黃素在姜黃制品中作為最具活性的成分，具有抗腫瘤、抗炎、抗氧化、降血壓、降血脂、保肝護(hù)功能等多種藥理作用。本研究通過(guò)對(duì)姜黃素的醇提工藝進(jìn)行優(yōu)選，利用姜黃素對(duì)小鼠、草魚(yú)和翹嘴紅鲌進(jìn)行肝臟保護(hù)試驗(yàn)研究。為姜黃素作為新藥在水產(chǎn)動(dòng)物肝膽疾病的預(yù)防和治療奠定基礎(chǔ)。本課題研究的方法和結(jié)果如下:
　　1.首先對(duì)姜黃素的提取條件進(jìn)行優(yōu)選，對(duì)乙醇濃度、用量、提取時(shí)間和次數(shù)進(jìn)行正交試驗(yàn)，通過(guò)姜黃素含量、姜黃總素含量和浸膏得率作為考察指標(biāo)，最終確定最佳

2、提取工藝為:利用80％乙醇濃度，8倍體積的乙醇用量進(jìn)行提取，提取3次，每次提取時(shí)間1.5 h，該條件下提取的姜黃素含量達(dá)到391.6 mg，姜黃總素的吸光度值達(dá)到了0.610，浸膏得率達(dá)到13.92％，提取效果較好及穩(wěn)定。
　　2.用不同劑量的姜黃浸膏散對(duì)小白鼠進(jìn)行口灌，正常喂食7d后，用0.12％CCl4對(duì)小鼠肝損傷模型進(jìn)行建立，腹腔注射，24 h后采集血清和肝臟，測(cè)定各指標(biāo)。結(jié)果顯示:一定含量的姜黃浸膏散能夠顯著降低CCl4所

3、致肝損傷小鼠血清中GPT/ALT、GOT/AST值(P＜0.01或P＜0.05)，降低其肝勻漿中MDA含量，增加SOD、CAT、GSH-PX活性，肝組織病理變化明顯得到改善。表明姜黃素對(duì)CCl4所致的小鼠急性肝損傷具有顯著的保護(hù)作用。
　　3.通過(guò)不同濃度CCl4對(duì)草魚(yú)進(jìn)行腹腔注射，分別于不同時(shí)間點(diǎn)采集血清，測(cè)定血清學(xué)指標(biāo)，最后結(jié)果顯示:15％CCl4腹腔注射24 h后，血清轉(zhuǎn)氨酶AST和ALT顯著升高，肝臟切片有明顯壞死和空泡，

4、故選擇15％CCl424 h進(jìn)行草魚(yú)肝損傷模型建立;用口灌法對(duì)草魚(yú)進(jìn)行用藥，不同濃度的姜黃素灌藥7天后，進(jìn)行造模，測(cè)定血清學(xué)指標(biāo)，血清中AST和ALT含量隨著姜黃素濃度的升高逐漸下降，在150 mg/kg下降最為顯著，初步判定姜黃素對(duì)草魚(yú)肝臟有一定保護(hù)作用。體外，用不同濃度的姜黃素對(duì)草魚(yú)原代肝細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，測(cè)定原代細(xì)胞的存活率，結(jié)果顯示，隨著姜黃素濃度的增高，草魚(yú)原代細(xì)胞存活率逐漸增高，在400μM達(dá)到最大，可得出，姜黃素可提高草魚(yú)原代

5、細(xì)胞存活率，抑制了其凋亡。
　　4.通過(guò)不同濃度姜黃素拌飼，對(duì)翹嘴紅鲌進(jìn)行投喂，20 d后，采集血清和肝臟樣品，測(cè)定相關(guān)指標(biāo)。藥效結(jié)果顯示:50 mg/kg姜黃素對(duì)翹嘴紅鲌有一定的保肝效果。同時(shí)對(duì)姜黃素飼養(yǎng)的翹嘴紅鲌進(jìn)行低氧處理并設(shè)置空白對(duì)照，在不同時(shí)間點(diǎn)采集肝臟樣品，測(cè)定樣品IGFBP-1基因的表達(dá)變化，結(jié)果顯示，在低氧處理6h時(shí)，空白組該基因表達(dá)量急劇增加，說(shuō)明低氧可以強(qiáng)烈誘導(dǎo)肝臟中IGFBP-1基因的表達(dá)，促進(jìn)其耐低氧應(yīng)激能