糖尿病大鼠心肌超微結(jié)構(gòu)及鈣離子調(diào)控蛋白基因表達的改變.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、實驗?zāi)康?該研究以糖尿病大鼠為模型,研究糖尿病時心肌細胞的結(jié)構(gòu)變化及Ca<'2+>調(diào)控蛋白SERCA、PLB、IP<,3>R<,2>、RyR<,2>、L型鈣通道等基因表達的改變,以探討糖尿病心肌病的病理生理機制.實驗方法:經(jīng)尾靜脈注射四氧嘧啶(40mg/kg)制備糖尿病大鼠模型,對照組大鼠的尾靜脈注射相同體積的生理鹽水.分別于2、4、6周大鼠處死前測血糖,如血糖>16.7mmol/L者確認為糖尿病大鼠.取心尖部組織用40g/L多聚甲醛固

2、定,經(jīng)脫水,透明,石蠟包埋,制成4μ m切片后行H.E常規(guī)染色.取少許心肌組織用2.5％戊二醛固定,制備電鏡標本,透射電鏡觀察大鼠心肌超微結(jié)構(gòu)的改變.去除心房,用浸在液氮罐中的不銹鋼夾子將心臟夾扁后打碎速凍后在-70℃低溫冰箱中保存?zhèn)溆?采用一步法提取細胞總RNA,測定260nm和280nm處的吸光度OD值,要求全部樣本的A<,260/280>比值在1.8~2.0之間.再行RNA的逆轉(zhuǎn)錄和心肌SERCA、PLB、IP<,3>R<,2>、

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