硫辛酸對阿爾茨海默病模型大鼠SOD、MDA、P-CREB水平的影響.pdf

1、背景:阿爾茨海默病是一種最常見的以認知功能障礙為主要特征的的神經系統(tǒng)退行性疾病，其主要病理特征包括大腦皮質和海馬區(qū)域廣泛的神經元喪失，細胞內的神經原纖維纏結和細胞外老年性β-amyloid(Aβ)斑塊沉積，目前我國大約有400萬老年癡呆患者，其中AD占到了一半及以上，AD患者腦中出現的大量高密度的淀粉樣β-蛋白(Aβ)以及Aβ具有的神經毒性作用是導致AD的重要原因，Aβ可以通過誘導氧化應激的產生來發(fā)揮其毒性作用，越來越多的證據表明，氧化

2、應激是AD的早期事件。當機體氧化及抗氧化體系失衡時，會產生過多的氧自由基，引起脂質過氧化，丙二醛(MDA)就是脂質過氧化的產物，它可以造成組織損傷，超氧化物歧化酶(SOD)是機體的一種抗氧化劑，能夠清除體內產生的氧自由基，避免體內過氧化物質的堆積。Camp反應原件結合蛋白(creb)作為一種記憶功能蛋白，能夠調節(jié)神經系統(tǒng)神經元的生長發(fā)育，磷酸化的creb能夠通過調節(jié)靶基因的表達影響學習記憶功能。硫辛酸是一種超強型的抗氧化劑，被稱為“萬能

3、抗氧化劑”，它的抗氧化特性包括螯合金屬離子、清除活性自由基、再生內源性抗氧化劑及修復氧化損傷等，有研究表明，硫辛酸能夠上調p-creb的水平，從而改善AD大鼠的空間學習記憶功能。
　　目的:關于Aβ通過氧化應激參與AD發(fā)病機制以及抗氧化藥物在AD治療中的實驗研究進展，近年來已有不少的報道。本文主要就硫辛酸進行研究，以期為AD的抗氧化治療提供線索和依據。
　　方法:健康清潔級SD雄性大鼠40只，按照隨機數字表法，隨機分為假手術

4、組，AD模型組，硫辛酸低劑量組和硫辛酸高劑量組，每組10只。造模前預給藥3周，硫辛酸低劑量組給予腹腔注射硫辛酸25mg/kg·d，硫辛酸高劑量組給予腹腔注射硫辛酸100mg/kg.d，假手術組、模型組給予等體積的生理鹽水腹腔注射1次/日，給藥三周后，采用立體定位儀向大鼠雙側海馬區(qū)注射凝聚態(tài)Aβ1-42各2.5μl建立AD動物模型，期間持續(xù)給藥，造模1周后通過Morris水迷宮實驗測試各實驗組大鼠逃避潛伏期及穿越平臺次數的變化，來觀察硫辛

5、酸對大鼠空間學習記憶的影響，并檢測四組大鼠海馬區(qū)SOD活力及MDA含量，通過HE染色觀察大鼠海馬CA1區(qū)錐體細胞的形態(tài)學變化，采用Western Blot法檢測磷酸化creb蛋白的表達水平。
　　結果:
　　1.各組大鼠Morris水迷宮實驗逃避潛伏期及穿越平臺次數比較四組大鼠逃避潛伏期不同(F=6.858，P＜0.05)，穿越平臺次數不同(F=14.831，P＜0.05)。模型組，硫辛酸低劑量組和高劑量組比假手術組逃避潛伏

6、期明顯延長(P＜0.05），穿越平臺次數明顯減少(P＜0.05）。
　　2.各組大鼠海馬HE染色的比較假手術組海馬CA1區(qū)錐體細胞排列整齊，形態(tài)正常，結構致密，分布均勻，數量多;模型組海馬CA1區(qū)神經元細胞排列稀疏，明顯減少，結構紊亂，數量減少;治療組與模型組大鼠相比，各治療組大鼠海馬形態(tài)均不同程度恢復，以高劑量組最為明顯，神經元數量增多，細胞排列整齊，結構致密，形態(tài)正常，分布均勻。
　　3.各組大鼠海馬組織SOD活力及MD

7、A含量的比較四組大鼠海馬組織SOD活力不同(F=78.154 P＜0.05)，假手術組較模型組大鼠海馬組織SOD活力處于較高水平(P＜0.05），治療組與模型組相比，各治療組大鼠海馬組織SOD活力均較模型組的水平高(P＜0.05），高劑量組較低劑量組增高明顯（P＜0.05）。
　　四組大鼠海馬組織MDA含量不同(F=17.411 P＜0.05)，假手術組較模型組大鼠海馬組織MDA含量處于較低水平（P＜0.05），治療組較模型組大鼠

8、海馬組織MDA含量均降低(P＜0.05），高劑量組較低劑量組降低明顯(P＜0.05)。
　　4.大鼠海馬組織中Western Blot法檢測p-CREB蛋白水平比較磷酸化的creb在四組大鼠海馬組織表達不同(F=68.528，P＜0.05)，模型組比假手術組表達明顯降低（P＜0.05），硫辛酸治療組比模型組表達增多(P＜0.05），高劑量組比低劑量組表達增多(P＜0.05）。
　　結論:采用在大鼠雙側海馬區(qū)注射凝聚態(tài)Aβ1-