吸煙對(duì)高密度脂蛋白抗氧化功能的影響.pdf

1、背景和目的：
　　 高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)通過促進(jìn)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)、抗氧化和抗炎癥等功能,在抗動(dòng)脈粥樣硬化中發(fā)揮了重要的作用.在臨床上,通過檢測血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C),間接反映人體循環(huán)血液中HDL的水平.人們很早就發(fā)現(xiàn),HDL-C的水平和冠心病風(fēng)險(xiǎn)負(fù)相關(guān),并且將提高HDL-C水平作為抗動(dòng)脈粥樣硬化治療的靶標(biāo)之一.然而最近的研究表明,HDL的功能在急性應(yīng)激或慢性炎癥狀態(tài)等

2、條件下將被削弱甚至發(fā)生逆轉(zhuǎn).于是人們認(rèn)識(shí)到,HDL的功能比水平更重要.
　　 脂質(zhì)氧化是動(dòng)脈粥樣硬化起始的核心事件,通過誘導(dǎo)泡沫細(xì)胞生成和凋亡而形成粥樣斑塊.吸煙是動(dòng)脈粥樣硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素.大量研究表明,吸煙能夠使低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的水平升高而使HDL-C水平降低,并且戒煙能夠使血脂成分改善.然而,人們對(duì)吸煙過程中HDL的功能變化尚不清楚.本研究的目的,即針對(duì)既往無吸煙史和有長期吸煙史的健康人群,測定其在單次吸煙

3、前后HDL抗氧化功能的改變,并且嘗試探尋其機(jī)制.
　　 方法：
　　 1.收集20名無吸煙史和22名長期吸煙的健康受試者吸煙前后的血清樣本,將血樣分成4組:無吸煙史組單次吸煙前、無吸煙史組單次吸煙后、長期吸煙組單次吸煙前、長期吸煙組單次吸煙后,凍存于-80℃待用。
　　 2.通過密度梯度超速離心方法分離高密度脂蛋白,BCA法測定其濃度,瓊脂糖凝膠電泳鑒定其純度
　　 3.酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測H

4、DL上淀粉樣蛋白A(SAA)的含量。
　　 4.將各個(gè)受試者的LDL分別通過檢測紫外光(波長234nm)下OD值,以評(píng)價(jià)LDL基礎(chǔ)氧化程度;之后加入銅離子氧化,記錄氧化曲線及各個(gè)參數(shù),以氧化速度達(dá)峰時(shí)間(t at Vmax)和最大OD值(ODmax)分別評(píng)估LDL的氧化易感性和最終氧化程度。
　　 5.將無吸煙史組單次吸煙前低密度脂蛋白等比例混合,作為正常態(tài)LDL(LDLpool).先將各個(gè)受試者的HDL分別通過檢測紫外

5、光(波長234nm)下OD值,以評(píng)價(jià)HDL基礎(chǔ)氧化程度；再將其與LDLpool等比例混合,加入銅離子氧化,記錄氧化曲線及各個(gè)參數(shù),以遲滯時(shí)間(Tlag)和氧化速度達(dá)峰時(shí)間評(píng)估HDL抗氧化性能。
　　 6.熒光法測定血清對(duì)氧磷酶-1(PON-1)活性。
　　 結(jié)果
　　 1.無吸煙史組和長期吸煙組單次吸煙后心率升高(67.2±13.4對(duì)71.5±9.9,p<0.05；74.8±10.5對(duì)78.4±9.2,p<0.0

6、5),收縮壓明顯升高(116.2±13.4對(duì)119.8±13.3,p<0.01；123.4±2.8對(duì)126.2±3.9,p<0.01),舒張壓明顯升高(71.0±8.9對(duì)76.8±10.0,p<0.01;70.8±8.0對(duì)74.2±7.5,<0.01).
　　 2.長期吸煙組膽紅素,無論是總膽紅素或直接膽紅素均較無吸煙史組明顯降低(15.15±5.42對(duì)10.80±4.05,p<0.01；5.07±2.20對(duì)3.53+1.21,

7、p<0.01),亦低于無吸煙史組單次吸煙后(14.37±7.05對(duì)10.80±4.05,p<0.05;4.84±2.59對(duì)3.53±1.21,p<0.05).
　　 3.長期吸煙組單次吸煙后尿酸升高(273.7±56.9對(duì)323.8±49.4,p<0.05).
　　 4.無吸煙史組單次吸煙后,SAA水平明顯升高(10.07±4.37對(duì)15.83±8.50,p<0.01).
　　 5.長期吸煙組LDL基礎(chǔ)OD值,明

8、顯高于無吸煙史組及其單次吸煙后(0.209±0.025對(duì)0.276±0.054,p<0.01；0.217±0.052對(duì)0.276±0.054,p<0.01).
　　 6.長期吸煙組LDL氧化速度達(dá)峰時(shí)間低于無吸煙史組及其單次吸煙后(52.5±15.2對(duì)45.0±8.7,p<0.05；53.9±14.9對(duì)45.0±8.7,p<0.01)；長期吸煙組吸煙后最大OD值升高(0.580±0.162對(duì)0.707±0.118,p<0.05)

9、.
　　 7.無吸煙史組或長期吸煙組單次吸煙后遲滯時(shí)間均有所下降(96.0±14.4對(duì)88.5±10.8,p<0.05；106.0±15.6對(duì)89.4±20.3,p<0.05),長期吸煙者遲滯時(shí)間高于無吸煙史組及其單次吸煙后(96.0±14.4對(duì)106.0±15.6,p<0.05；89.4±20.3對(duì)106.0±15.6,p<0.01)；長期吸煙組吸煙前后(下降)差值,相比無吸煙史組增大.
　　 8.長期吸煙組氧化速度達(dá)

10、峰時(shí)間高于無吸煙史組及其單次吸煙后(135.5±16.7對(duì)145.4±14.0,p<0.05,128.1±17.7對(duì):1.45.4±14.0,p<0.01).
　　 結(jié)論
　　 1.單次吸煙后,無吸煙史者和長期吸煙者,其機(jī)體均處于急性應(yīng)激狀態(tài).
　　 2.長期吸煙者其機(jī)體處于慢性氧化狀態(tài),膽紅素等內(nèi)源性抗氧化物質(zhì)被過度消耗.
　　 3.單次吸煙使無吸煙史者和長期吸煙者HDL抗氧化能力均出現(xiàn)降低.