肺表面活性物質(zhì)蛋白B基因單核苷酸多態(tài)性與新生兒呼吸窘迫綜合征的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：新生兒呼吸窘迫綜合征是早產(chǎn)兒的常見病和多發(fā)病，病死率和致殘率均較高，本病被認(rèn)為是一種多因素或/和多基因疾病，主要是由于肺臟缺乏肺表面活性物質(zhì)所致，肺表面活性物質(zhì)是由磷脂和四種肺表面活性物質(zhì)蛋白(SP-A、SP-B、SP-C、SP-D)構(gòu)成的磷脂-蛋白復(fù)合物，主要的生理作用是降低肺泡表面張力防止肺泡萎陷，其中SP-B對于維持肺表面活性物質(zhì)的生理活性至關(guān)重要，是PS發(fā)揮功能的重要載體，SP-B具有促進(jìn)磷脂薄膜形成、分布、吸附的作用，因

2、此SP-B的含量和活性的改變可影響肺功能而引起相應(yīng)的肺疾病。SP-B只有一個基因，定位于2p12→p11.2，SP-B基因具有高度多態(tài)性，其增強子、啟動子、內(nèi)含子和編碼區(qū)域、5’側(cè)翼非翻譯區(qū)、3’側(cè)翼非翻譯區(qū)具有多個單核苷酸多態(tài)性位點。已有研究證實SP-B基因多態(tài)性是引起RDS的重要因素。本研究旨在選擇海南漢族早產(chǎn)兒為研究對象，應(yīng)用病例-隊列研究與聚合酶聯(lián)反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性技術(shù)相結(jié)合的分子流行病學(xué)方法檢測SP-B8714G/C、

3、SP-B1580C/T、SP-B-18A/C三個SNP位點的基因型頻率及等位基因分布的情況，從而了解海南漢族人群中肺表面活性物質(zhì)蛋白B基因分布的特點并探討肺表面活性物質(zhì)蛋白B基因單核苷酸多態(tài)性與新生兒呼吸窘迫綜合征的關(guān)系，篩選出RDS的易感基因。從基因水平探討RDS的發(fā)病機理，從而為RDS的防治提供理論依據(jù)。
　　 方法：選擇88例海南漢族RDS患兒作為研究組，同期在海南省人民醫(yī)院新生兒科住院無并發(fā)癥的海南漢族早產(chǎn)兒103例作為

4、對照組，所有研究對象均來源于海南省人民醫(yī)院2009年7月～2010年10月住院的早產(chǎn)兒。每位研究對象均抽取2ml靜脈血置于EDTA管中，選用DNA提取試劑盒提取DNA。應(yīng)用PCR方法擴增SP-B8714G/C、SP-B1580C/T、SP-B-18A/C三個位點片段，進(jìn)行酶切后根據(jù)限制性片段長度多態(tài)性圖譜確定基因型，分析基因型頻率及等位基因分布的情況，檢驗三個位點遺傳吻合度，分析三個位點與RDS的關(guān)系。應(yīng)用基因計數(shù)方法計數(shù)出等位基因頻率

5、。群體之間等位基因頻率的差異及基因型Hardy-Weinberg平衡吻合度采用卡方檢驗。統(tǒng)計分析采用SPSS11.5軟件包。
　　 結(jié)果：
　　 1．對比兩組的臨床資料，我們發(fā)現(xiàn)兩組間胎齡、性別、出生體重、產(chǎn)前使用激素?zé)o顯著性差異。
　　 2．對RDS組和對照組患兒的SP-B-(18A/C)、SP-B1580C/T、SP-B8714G/C位點進(jìn)行Hardy-Weinberg檢驗提示均符合Hardy-Weinber

6、g平衡，表明各基因頻率在海南漢族人群中達(dá)到遺傳平衡，具有群體代表性。
　　 3.SP-B8714G/C、SP-B1580C/T、SP-B-18A/C位點多態(tài)性的分布以及與RDS關(guān)系。
　　 (1)-18A/C:RDS組CC、AC、AA基因型分別為36％，52％，12％，A等位基因為37.5％，C等位基因為62.5％，對照組的CC、AC、AA基因型分別為33％，48％，19％。A等位基因為43.2％，C等位基因為56.8％

7、。經(jīng)x2檢驗，RDS組和對照組兩組人群基因型頻率分布無顯著差異，兩組人群基等位基因頻率分布也無顯著差異。
　　 (2)1580C/T:RDS組TT、TC、CC基因型分別為5.7％，28.4％，65.9％，T等位基因為19.9％，C等位基因為80.1％，對照組的TT、TC、CC基因型分別為43.7％，46.6％，43.7％。T等位基因為35.9％，C等位基因為64.1％。經(jīng)x2檢驗，RDS組和對照組兩組人群基因型頻率分布有統(tǒng)計學(xué)差

8、異，兩組人群等位基因頻率分布也有顯著差異，攜帶C等位基因的個體患RDS的風(fēng)險是非攜帶者的2.26倍OR=2.26，95％CI(1.42～3.60)。
　　 (3)8714G/C:RDS組GG、GC、CC基因型分別為20％，54％，26％，G等位基因為47.2％，C等位基因為52.8％，對照組的GG、GC、CC基因型分別為14％，58％，28％。G等位基因為42.7％，C等位基因為57.3％。經(jīng)x2檢驗，RDS組和對照組兩組人群基