中藥桑白皮抗HIV活性組(成)分的研究.pdf

1、艾滋病嚴(yán)重威脅著人類的健康，目前臨床上尚缺少有效、安全、低毒的抗HIV藥物。為了從中藥中尋找具有抑制HIV活性的天然有效成分，本課題組在前期工作中，采用HIV的5′端LTR轉(zhuǎn)染的BF-24細(xì)胞為活性篩選模型，以牙齦卟啉單胞菌為激活子，以報(bào)告基因氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶基因（CAT）的表達(dá)量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，有針對(duì)性的對(duì)大量中藥進(jìn)行抑制HIV活性的篩選研究，結(jié)果表明：中藥桑白皮65％的乙醇粗提物具有較強(qiáng)的下調(diào)控HIV-1LTR的作用。本課題組對(duì)桑白皮抗

2、HIV活性成分進(jìn)行了系統(tǒng)地追蹤分離，希望發(fā)現(xiàn)具有下調(diào)控HIV-1LTR作用的有效部位和有效成分，闡明中藥桑白皮具有抗HIV活性的物質(zhì)基礎(chǔ)，為桑白皮的進(jìn)一步的開發(fā)利用及抗HIV新藥的研發(fā)提供基礎(chǔ)資料。
　　取桑白皮藥材粉碎，用65％的乙醇提取得到粗浸膏，按極性大小劃分成石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位、水部位。各提取部位藥理活性篩選結(jié)果表明，乙酸乙酯部位顯示較強(qiáng)的抗HIV活性，為桑白皮的有效部位。對(duì)乙酸乙酯部位進(jìn)行系統(tǒng)的分離純化，

3、得到了9個(gè)化合物。根據(jù)其理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)鑒定為三十三烷(tritriacontaneⅠ)、棕櫚酸(hexadecanoicacidⅡ)、β-谷甾醇(β-sitosterolⅢ)、樺木酸(betulicacidⅣ)、齊墩果酸(oleanolicacidⅤ)、東莨菪內(nèi)酯(scopoletinⅥ)、4′,5,7-三甲基-8-(3,3-二甲基烯丙基)-黃酮(4′,5,7-trihydroxy-8-(3,3-dimethylallyl)-fla

4、voneⅦ)、摩魯新L(morusigninLⅧ)和胡蘿卜苷(daucosterolⅨ)，其中棕櫚酸(hexadecanoicacidⅡ)為首次從桑白皮中分出。4′,5,7-三甲基-8-(3,3-二甲基烯丙基)-黃酮（4′,5,7-trihydroxy-8-(3,3-dimethylallyl)-flavoneⅦ）為首次從?？浦参镏蟹殖觥?br>　　本文建立了應(yīng)用高效液相測(cè)定桑白皮中摩魯新L含量的方法。色譜柱條件為：AlltimaC18

5、色譜柱(4.6mmx250mm,5μm)，流動(dòng)相乙腈-水-乙酸(50:50:0.1)，檢測(cè)波長(zhǎng)270nm。標(biāo)準(zhǔn)曲線顯示，摩魯新L在3.6—18μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為y=114248x-20613，R2=0.9984。樣品平均回收率為100.1％，RSD為1.4％。
　　目前桑白皮的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)尚不完善，為充分開發(fā)利用桑白皮藥材，有必要對(duì)其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究。因?yàn)樯０灼ぶ泻休^多的黃酮類化合物，并且此類化合物也是桑白